Summary
Aquí se presenta un protocolo para medir los leucocitos de sangre periférica utilizando un analizador de leucocitos basado en tarjetas POCT. Las mismas muestras de sangre fueron analizadas por dos analizadores hematológicos automatizados para evaluar la consistencia y precisión de los resultados. Los resultados mostraron que el analizador evaluado tuvo una buena correlación con el sistema de referencia.
Abstract
Los glóbulos blancos (WBC) son un indicador importante de inflamación en el cuerpo, y pueden ayudar a distinguir entre infecciones bacterianas y virales. En la actualidad, la mayoría de las instituciones médicas primarias en China tienen un bajo porcentaje de adopción de la tecnología de análisis de sangre, y se necesita urgentemente un sistema de detección de hematología con una alta relación precio-rendimiento y fácil operación en los centros de atención primaria de salud. Este documento presenta el principio y los procedimientos de operación de un analizador de leucocitos basado en tarjetas de prueba en el punto de atención (POCT) (sistema evaluado), que se utilizó para detectar índices de glóbulos blancos como neutrófilos, linfocitos y células de grupos intermedios (incluidos eosinófilos, basófilos y monocitos) en sangre total. Los resultados del sistema evaluado se compararon con los de dos analizadores automáticos de hematología comerciales (sistema de referencia). Se analizó la correlación y consistencia entre el sistema evaluado y los sistemas de referencia comercial. Los resultados mostraron que el recuento de leucocitos y el número de granulocitos detectados por los sistemas evaluados y de referencia mostraron una fuerte correlación positiva (rs = 0,972 y 0,973, respectivamente), mientras que el número de linfocitos mostró una correlación relativamente baja (rs = 0,851). Un gráfico de Bland-Altman mostró que la principal diferencia entre los valores detectados por el sistema evaluado y los sistemas de referencia está dentro de los límites de acuerdo del 95% (LoA), lo que indica que los dos sistemas están en buen acuerdo. En conclusión, el sistema evaluado tiene una excelente correlación, consistencia robusta y una comparación confiable con los resultados de los analizadores hematológicos automáticos ampliamente utilizados. Es ideal para la detección de glóbulos blancos en instituciones médicas primarias donde no se dispone de un analizador de hematología de cinco categorías completamente automático, especialmente durante el período de prevención y control normalizado de COVID-19.
Introduction
El recuento o diferencial de glóbulos blancos (WBC) es un indicador importante para reflejar la inflamación del cuerpo, que puede distinguir la infección bacteriana de la infección viral. El análisis de glóbulos blancos también es útil para guiar el diagnóstico de seguimiento y el tratamiento1. En la actualidad, el analizador de hematología totalmente automático de cinco clasificaciones ha sido ampliamente utilizado en unidades médicas grandes y medianas, ya que es automático, tiene alta eficiencia, produce resultados precisos y confiables, y reduce efectivamente la intensidad de trabajo de los técnicos de laboratorio. Juega un papel importante en el examen clínico 2,3. Sin embargo, la mayoría de las instituciones médicas primarias, como los centros de salud comunitarios y las clínicas privadas, tienen una baja tasa de adopción de un analizador de hematología. Según un estudio multicéntrico a nivel nacional sobre la construcción de laboratorios clínicos en China, la construcción de laboratorios de instituciones médicas primarias es insuficiente, como lo demuestra el pequeño tamaño de los laboratorios, la transmisión insuficiente de talentos y la difusión de la ciencia y la tecnología al campo, entre otros factores4.
Desde diciembre de 2019, COVID-19 comenzó a propagarse por todo el mundo y se convirtió en una pandemia global. En la "era post-epidémica", se han propuesto una serie de políticas nacionales para aplicar las medidas normalizadas de prevención y control de las situaciones epidémicas. El laboratorio de instituciones médicas primarias desempeña un papel importante en el diagnóstico y tratamiento de base y en la prevención y el control de enfermedades. Es la primera línea de defensa y control en situaciones epidémicas, y es fundamental para la prevención y el control de la COVID-195. Algunos estudios han demostrado que la detección de linfocitos de sangre periférica y neutrófilos contribuirá a la detección, el diagnóstico y el tratamiento de pacientes con COVID-19, y que la relación neutrófilos/linfocitos también se puede utilizar como indicadores clínicos de alerta temprana de COVID-19 grave y crítico 6,7. Además, la detección de leucocitos tiene la ventaja de proporcionar un informe rápido. Las instituciones médicas primarias y de salud pueden llevar a cabo ampliamente la detección de leucocitos para ayudar a detectar y detectar sospechas de infecciones a tiempo.
El analizador de leucocitos basado en tarjetas POCT (sistema evaluado; consulte la Tabla de materiales) es un analizador de células sanguíneas de tres clasificaciones basado en el estándar de oro "principio de Coulter". El sistema evaluado proporciona resultados de análisis cuantitativos de un histograma de leucocitos y siete parámetros sanguíneos, incluido el recuento de glóbulos blancos, el número de granulocitos (Gran#), el porcentaje de granulocitos (Gran%), el número de linfocitos (Lym#), el porcentaje de linfocitos (Lym%), el número de células intermedias (Mid#) y el porcentaje de células intermedias (Mid%). Adopta la tecnología innovadora basada en tarjetas y tiene ventajas como la disponibilidad de un kit de detección para una sola persona, ausencia de residuos líquidos, detección rápida en 30 s, estar libre de mantenimiento de rutina y operación fácil de usar. Por lo tanto, es particularmente adecuado para las instituciones médicas primarias. Este estudio tiene como objetivo evaluar el rendimiento de detección clínica del analizador de leucocitos basado en tarjetas POCT comparándolo con dos analizadores de hematología comercial totalmente automáticos (sistema de referencia 1 y sistema de referencia 2; ver Tabla de materiales) de laboratorios de dos hospitales públicos a gran escala.
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Protocol
Este estudio y el uso de muestras de sangre humana fueron aprobados por el Comité de Ética del Primer Hospital Afiliado de la Universidad Médica de Guangzhou (GYYY-2016-73). Todos los participantes han dado su consentimiento por escrito de forma independiente o a través de sus padres (en el caso de los niños).
1. Información básica de la comisión de estudio
NOTA: Se recolectó sangre venosa de pacientes que visitaron el Primer Hospital Afiliado de la Universidad Médica de Guangzhou (Hospital 1) y el Quinto Hospital Afiliado (Zhuhai) de la Universidad Médica zunyi (Hospital 2). El instrumento utilizado para el examen de rutina sanguínea en el Hospital 1 es el Sistema de Referencia 1, mientras que el Hospital 2 utiliza el Sistema de Referencia 2.
- Se recolectaron un total de 1066 muestras de sangre de pacientes que visitaron el Hospital 1 (532) y el Hospital 2 (534) y se sometieron a exámenes de rutina de sangre durante enero de 2021.
NOTA: Los pacientes fueron seleccionados al azar, provenían de múltiples departamentos y sufren de diversas enfermedades. - Excluir a los pacientes con registros médicos incompletos y a aquellos que no cooperaron o se negaron a dar su consentimiento informado. Excluir a aquellos pacientes cuyas muestras de sangre exhibieron hemólisis, sangre de quilo o turbidez, o si la sangre fue inadecuada en volumen o almacenada durante más de 24 horas.
2. Flujo de estudio y mediciones de interés
NOTA: El sistema evaluado necesita 5 μL de la muestra de sangre para determinar el WBC y los tres parámetros de clasificación. Después de recolectar sangre, se utilizó el sistema evaluado y el sistema de referencia para el examen de rutina de sangre.
- Detectar WBC y los tres parámetros de clasificación de 532 y 534 muestras de sangre utilizando el sistema de referencia y el sistema evaluado, respectivamente.
- Deje que un técnico altamente capacitado renumere aleatoriamente las muestras de sangre seleccionadas después de completar la prueba clínica con el sistema de referencia. Luego, entregue las muestras a otro técnico altamente capacitado para la detección del WBC y los parámetros de clasificación utilizando el sistema evaluado.
- Revelar los resultados de los dos sistemas.
- Pídale a un tercer técnico que analice los cinco indicadores (a saber, recuento de glóbulos blancos, Gran #, Gran%, Lym #, Lym%) compartidos solo por los sistemas evaluados como por los de referencia.
3. Procedimiento de utilización del sistema evaluado
NOTA: El sistema evaluado utiliza el principio de impedancia eléctrica (principio de Coulter) para contar los glóbulos blancos en el elemento de detección. El protocolo de prueba se divide en seis partes: iniciar el analizador, preparación de la prueba, recolección de sangre, mezcla de reactivos, análisis de muestras y apagar el analizador.
- Inicie el analizador
- Gire el interruptor de encendido [O/I] en la parte posterior del analizador a [I]. Compruebe que la luz indicadora del analizador esté encendida.
- Ingrese el nombre de usuario y la contraseña correctos en el cuadro de diálogo de inicio de sesión y haga clic en Iniciar sesión. Asegúrese de que el sistema realiza la autocomprobación y la inicialización de inicio automáticamente y, a continuación, muestra la página de inicio análisis de muestra .
- Preparación de exámenes
NOTA: Una prueba completa de muestra de sangre requiere cuatro consumibles: lanceta sanguínea, reactivo hemolítico, pipeta cuantitativa con un tubo capilar en el interior y módulo de detección de células sanguíneas (Figura 1).- Haga clic en Siguiente muestra, ingrese correctamente el género, el nombre y otra información clínica (según sea necesario) y seleccione un grupo de referencia apropiado. Haga clic en Aceptar para guardar la información.
NOTA: Los diferentes grupos de edad tienen su propio intervalo de referencia, por lo que elegir el grupo de referencia correcto puede obtener un aviso de alarma más adecuado. Recién nacido: 1-28 días de edad; Niños: 29 días a 14 años; Adulto Masculino/Femenino/General: mayor o igual a 15 años. - Rasgue la película delgada del módulo de detección de células sanguíneas, presione el botón de entrada / salida del almacén y coloque el módulo de detección de células sanguíneas en el almacén de la máquina correctamente, con su orificio hacia afuera.
- Perfore la película de sellado del reactivo hemolítico con la punta de una pipeta cuantitativa.
- Haga clic en Siguiente muestra, ingrese correctamente el género, el nombre y otra información clínica (según sea necesario) y seleccione un grupo de referencia apropiado. Haga clic en Aceptar para guardar la información.
- Recolección de sangre
- Recolección de sangre capilar: Desinfecte el dedo anular izquierdo con un hisopo de algodón sumergido en alcohol de una manera y una vez. Después de que el alcohol se seque naturalmente, use una lanceta de sangre para perforar la piel del dedo anular izquierdo.
- Exprima suavemente la primera gota de sangre y límpiela con un hisopo de algodón. Exprima suficiente sangre para formar una "gota de agua" completa y recolecte 5 μL de la muestra de sangre usando el tubo capilar dentro de la pipeta cuantitativa.
- Recolección de sangre venosa: Recolecte 5 μL de la muestra de sangre venosa pre-obtenida utilizando el tubo capilar dentro de la pipeta cuantitativa. Todas las pruebas en este estudio utilizaron sangre venosa que se recolectó de cada paciente (5 ml) utilizando un vaso de vacío que contiene anticoagulante EDTA-K2 . Complete todas las pruebas dentro de los 30 minutos a 24 h.
- Recolección de sangre capilar: Desinfecte el dedo anular izquierdo con un hisopo de algodón sumergido en alcohol de una manera y una vez. Después de que el alcohol se seque naturalmente, use una lanceta de sangre para perforar la piel del dedo anular izquierdo.
- Mezcla de reactivos
- Inserte la pipeta cuantitativa en el reactivo hemolítico (2,5 ml) y presiónela con fuerza para liberar la muestra de sangre del tubo capilar.
- Mezcle la sangre en el tubo capilar y el reactivo hemolítico girándolo boca abajo 15-20 veces a una velocidad constante, hasta que no quede sangre roja obvia en el tubo capilar. En este estudio, la muestra de sangre se mezcla con reactivo hemolítico en una proporción de 1:500.
- Análisis de muestras
- Abra la tapa y exprima la solución en el módulo de detección de células sanguíneas.
- Pulse el botón Entrada/Salida del almacén . Después de que el módulo de detección de células sanguíneas ingrese al almacén, presione el botón Contar .
NOTA: Una luz indicadora verde parpadeante indica que el analizador está contando. El módulo de detección de células sanguíneas saldrá automáticamente del almacén después del conteo, y debe retirarse y eliminarse adecuadamente. Cada prueba dura solo 30 s. - En la interfaz del analizador, haga clic en el botón Aceptar dos veces para confirmar que se ha extraído el módulo de detección de células sanguíneas.
- En la interfaz del analizador, haga clic en el botón Imprimir para imprimir los resultados de la prueba.
- Apague el analizador
- En la interfaz del analizador, haga clic en el botón de apagado y seleccione Sí en el cuadro de diálogo que aparece en la interfaz. Compruebe que el sistema comienza a ejecutar la secuencia de apagado.
- Establezca el interruptor [O/I] en la parte posterior del mainframe en [O] después de completar la secuencia de apagado.
4. Análisis estadístico
- Detecte los valores atípicos utilizando el método generalizado de desviación extrema de estudiantes (ESD) y elimine estos valores atípicos para el análisis estadístico de seguimiento de acuerdo con los requisitos del documento8 EP9-A3 de la Asociación Americana para la Estandarización de Laboratorios Clínicos (CLSI).
- Calcular los parámetros descriptivos como medias y desviaciones estándar (DE) para datos continuos distribuidos normalmente; medianas y rangos intercuartílicos del 25% al 75% para datos no distribuidos normalmente; y frecuencias y porcentajes para datos categóricos.
- Utilice la prueba de Pearson χ2 o la prueba exacta de Fisher para determinar el grado de relación entre las variables categóricas. Utilice la prueba T de muestra pareada o la prueba U de Mann-Whitney para comparar datos numéricos entre grupos.
- Mostrar la distribución y asociación lineal de los resultados detectados de los dos sistemas mediante diagramas de dispersión. Aplicar la prueba de correlación no paramétrica de Spearman para acceder al grado de relación entre las variables cuantitativas. Utilice gráficos de Bland-Altman y el coeficiente de correlación intraclase (ICC) para verificar la concordancia entre los valores cuantitativos detectados por los dos sistemas.
- Analice los datos mediante el software estadístico de su elección. El valor de P < 0,05 se considera estadísticamente significativo.
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Representative Results
Datos de muestra
Un total de 1066 pacientes se inscribieron en dos centros de investigación, incluyendo el Hospital 1 (n = 532) y el Hospital 2 (n = 534). Las características del paciente se muestran en la Tabla 1. El porcentaje de varones es del 49,9% y la mediana de edad es de 52 (32, 66) años. Los pacientes inscritos en el estudio estaban compuestos por pacientes hospitalizados (51,1%), pacientes ambulatorios (39,0%) y pacientes de examen físico (8,4%). Las muestras analizadas fueron de pacientes que visitaron los departamentos de medicina interna (30,6%), los departamentos de cirugía (19,1%), los departamentos de obstetricia y ginecología (9,0%), los departamentos pediátricos (3,9%), etc.
Detección de resultados aberrantes (valores atípicos)
Tomando los resultados del sistema de referencia como eje horizontal y los resultados del sistema evaluado como eje vertical, se obtuvo un diagrama de dispersión de cinco índices leucocitarios de 1066 muestras (no se muestran los resultados). Los puntos anormales sospechosos son obvios en el diagrama de dispersión de cinco índices leucocitarios. De acuerdo con los resultados del método ESD, entre las 1066 muestras, hubo 16 valores atípicos en el recuento de LEC, 27 valores atípicos en Gran#, 8 valores atípicos en Gran%, 15 valores atípicos en Lym# y 9 valores atípicos en Lym%. Los datos se analizaron después de eliminar los valores atípicos, que representan menos del 5% en total.
Análisis de correlación en el sistema evaluado y sistemas de referencia
La Figura 2 muestra el diagrama de dispersión y el análisis de correlación de Spearman de los resultados de la prueba. Los resultados muestran que el recuento de WBC, Gran#, Gran%, Lym# y Lym% tienen buena linealidad y correlación entre los dos sistemas; el coeficiente lineal R2 está entre 0,7759 y 0,9676, y el coeficiente de correlación rspearman está entre 0,851 y 0,973 (todos los valores P < 0,001). WBC y Gran# exhiben la correlación más fuerte entre los dos sistemas (R2 = 0.9608 y 0.9676, respectivamente; rspearman = 0.972 y 0.973, respectivamente), mientras que Lym# exhibe la correlación más débil entre los sistemas (R2 = 0.7759; rspearman = 0.851). Sin embargo, no fue posible evaluar la correlación y consistencia de las células intermedias (Mid#/%), porque están separadas en divisiones más pequeñas (es decir, eosinófilos, basófilos y monocitos) en el sistema de referencia.
Análisis de consistencia
Se ha obtenido una gráfica de Bland-Altman para visualizar el análisis de consistencia y se ha marcado la SD ±2 como límites de acuerdo (LoA). Los resultados se muestran en la Figura 3. Para el WBC, el valor medio de la diferencia es de 0,9 x 109/L entre los sistemas evaluados y de referencia, y el intervalo de confianza (IC) del 95% de la diferencia es de -0,7 x 109 ~ 2,5 × 109/L.Hay muestras del 94,48% (992/1050) dentro del IC del 95%, lo que significa que los resultados del WBC detectados por el sistema evaluado están en buen acuerdo con el sistema de referencia. Para Gran# y Gran%, el valor medio de la diferencia entre los sistemas evaluados y de referencia es 0,8 x 109/L y 2,0%, respectivamente, mientras que el IC del 95% de la diferencia es 0,7 x 109 ~ 2,2 x 109/L y -7,7% ~ 11,7%, respectivamente. Hay 94,23% (979/1039) y 94,99% (1005/1058) muestras dentro del IC del 95%, respectivamente. Para Lym# y Lym%, hay muestras de 93.82% (986/1051) y 93.76% (991/1057) dentro del IC 95%, y el valor de diferencia promedio es de 0.33 x 109/L y 1.8%, respectivamente. Los valores medios de las diferencias en los índices leucocitarios están todos por encima de 0, lo que indica que los resultados de las pruebas del sistema evaluado son ligeramente superiores a los del sistema de referencia.
Análisis de correlación en diferentes grupos de pacientes
Los resultados del recuento de glóbulos blancos para las muestras de pacientes de diferentes edades y géneros y los de diferentes departamentos se compararon y analizaron para detectar correlaciones. Los resultados mostraron que el nivel de WBC del sistema evaluado es más alto que el del sistema de referencia. No hay diferencias significativas en la consistencia y la correlación entre los pacientes masculinos y femeninos (ICC: 0,97 versus 0,98; rspearman: 0,98 versus 0,97). La consistencia y la correlación son mejores para los pacientes hospitalizados que para los pacientes ambulatorios (ICC: 0,98 versus 0,96; rspearman: 0,98 versus 0,96), como se muestra en la Tabla 2.
Figura 1: Fotografías representativas del sistema evaluado y sus reactivos y consumibles de soporte. (A) El analizador utiliza el principio de Coulter para detectar leucocitos en sangre mediante tres clasificaciones. Su pequeño tamaño (242 mm x 397 mm x 321 mm) facilita su transporte. (B) Los reactivos y consumibles de soporte limitados se combinan en un traje como un kit de detección para una sola persona, que se puede almacenar y usar a temperatura ambiente. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 2: Diagramas de dispersión de cinco índices leucocitarios detectados por el sistema evaluado y el sistema de referencia. R2 = coeficiente de linealidad, rs = coeficiente de correlación de Spearman (IC del 95%) y n = tamaño de la muestra. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Figura 3: Diagrama de Bland-Altman de los cinco índices leucocitarios detectados por el sistema evaluado y el sistema de referencia. El eje Y representa la diferencia de valores medidos entre los sistemas evaluados y de referencia, mientras que el eje X representa el valor medio de los índices leucocitarios medidos por los sistemas evaluados y de referencia. La línea negra continua representa el valor de diferencia promedio para todo el grupo de muestras y las líneas negras discontinuas representan el 95% de los límites superiores e inferiores de acuerdo (límites medios de acuerdo ± 1.96 SD). ESi denota valores medidos por el sistema evaluado y RSi denota valores medidos por el sistema de referencia. Haga clic aquí para ver una versión más grande de esta figura.
Tabla 1: Datos generales de la población estudiada. n = tamaño de la muestra, IQR = rango intercuartílico. El valor P corresponde a la comparación de los datos de la muestra del Hospital 1 y del Hospital 2. Se utilizó la prueba de Chi-cuadrado (χ2) para comparar las diferencias entre las variables categóricas en grupos (cuando la frecuencia teórica era inferior a 5, se utilizó el método de probabilidad exacta de Fisher para calibrar), y la prueba t o la prueba U de Mann-Whitney para comparar datos numéricos entre grupos. Haga clic aquí para descargar esta tabla.
Tabla 2: Análisis de correlación de los resultados de WBC detectados por el sistema evaluado y el sistema de referencia en diferentes grupos de pacientes. n = tamaño de la muestra; IQR = rango intercuartílico; y ICC = coeficiente de correlación intraclase (un valor > 0,75 indica buena fiabilidad). rs = coeficiente de correlación de Spearman; rs de 0.90-1.00, 0.70-0.90, 0.50-0.70, 0.30-0.50 y 0-0.30 indican, respectivamente, una correlación positiva muy alta, alta, moderada, baja e insignificante. Haga clic aquí para descargar esta tabla.
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Discussion
Con el avance de la medicina de laboratorio moderna, ahora es típico ver varias tecnologías de detección utilizadas en el mismo o diferentes laboratorios para identificar el mismo marcador clínico. Como resultado, se debe poner más énfasis en la consistencia de los resultados de las pruebas para ayudar a las clínicas a hacer interpretaciones y juicios precisos de los resultados de las pruebas. Según la investigación, el valor total del equipo de laboratorio en los hospitales terciarios y laboratorios independientes es sustancialmente mayor que en los hospitales primarios y otras instituciones médicas4. Aunque este tipo de equipo tiene las ventajas de la detección de múltiples elementos, alta precisión, estabilidad y gran flujo de detección, tiene desventajas como ser costoso, grande y pesado, operación compleja, un requisito para muchos reactivos y una alta demanda de operadores de calidad profesional, entre otros, lo que lo hace inadecuado para que las instituciones médicas primarias lo usen. El desarrollo de instrumentos y equipos de detección se desarrolla constantemente en la dirección de la automatización, la inteligencia, la estandarización, la personalización y la pequeña portabilidad9. Las ventajas de los equipos de prueba POCT, como la alta puntualidad, ser livianos y fáciles de transportar, así como no tener mantenimiento, compensan las deficiencias de los analizadores de sangre grandes y son más fácilmente aceptados por las instituciones médicas primarias10. La realización de la comparabilidad de los resultados de las pruebas de la misma muestra y elementos por diferentes instrumentos de prueba es el contenido central de la gestión de la calidad del laboratorio11. Sin embargo, pocos estudios evalúan la correlación y la consistencia entre el analizador de hematología POCT y productos clínicos similares.
Los pacientes en este estudio fueron reclutados al azar de dos centros en la ciudad de Guangzhou (Hospital 1) y Zhuhai (Hospital 2), China. No hubo diferencias significativas en las proporciones de género entre los dos centros. Los pacientes inscritos incluyeron a aquellos que visitaron hospitales para un examen físico, y pacientes ambulatorios y hospitalizados de medicina interna, cirugía, obstetricia y ginecología, pediatría, departamentos de cuidados críticos, etc. La mediana de edad de los pacientes en el Hospital 1 es significativamente mayor que la del Hospital 2 (58 (37, 68) versus 46 (31, 63); P < 0,001). El Hospital 1 es un hospital especializado clave a nivel nacional para las enfermedades respiratorias, y la mayoría de los pacientes sufren enfermedades respiratorias que tienen más probabilidades de afectar a los ancianos12. El estudio científico del envejecimiento encontró que la proporción de personas mayores de 65 años en el Hospital 1 es mayor que la del Hospital 2 (6,67% frente a 5,01%)13.
Hay algunos valores atípicos en el recuento de granulocitos, que representan el 2,5%, pero los valores atípicos de todos los elementos son inferiores al 5%, lo que está dentro del rango aceptable. El coeficiente lineal R2 de los resultados de la prueba del sistema evaluado y el sistema de referencia son todos mayores que 0,75, lo que indica que las líneas de regresión lineal de los dos sistemas tienen una buena bondad lineal de ajuste, con un recuento de glóbulos blancos y un recuento de neutrófilos que tienen una mejor bondad lineal de ajuste. La correlación más fuerte se encontró entre el número de leucocitos y granulocitos (rs = 0,972 y 0,973, respectivamente) detectados por los dos sistemas, seguidos por el porcentaje de granulocitos y el porcentaje de linfocitos (rs = 0,939 y 0,932, respectivamente), y el número de linfocitos (rs = 0,851). Similar a un estudio reportado, el efecto del equipo de la serie POCT en el conteo de glóbulos blancos es mejor que los resultados de los índices clasificados14. Además, el gráfico de Bland-Altman de la diferencia entre los datos de prueba de los dos sistemas muestra que la mayoría de los puntos de prueba están dentro del límite de consistencia del 95%, lo que indica que los resultados de las pruebas del sistema de evaluación y el sistema de referencia están de acuerdo. Aunque los resultados muestran que el análisis de consistencia de los linfocitos es ligeramente inferior al de los leucocitos y los granulocitos, el coeficiente de correlación de los linfocitos sigue estando por encima de 0,85, lo que significa que los dos sistemas también tienen una buena consistencia a la hora de detectar linfocitos. Por otro lado, la gráfica de Bland-Altman muestra que los resultados de las pruebas del sistema evaluado son ligeramente superiores a los valores de prueba del sistema de referencia. Se especula que esto puede deberse a errores sistemáticos en el sistema evaluado, lo que hace que el resultado general sea alto. En primer lugar, se debe verificar cuidadosamente si el analizador se coloca correctamente antes de que comience la prueba; por ejemplo, el área circundante del instrumento debe mantenerse a una cierta distancia (≥ 20 cm) de la pared u obstáculos, y el espacio donde se coloca el instrumento debe estar bien ventilado. En segundo lugar, el equipo de I + D también puede ajustar los parámetros internos del sistema para corregir el error sistemático.
El novedoso sistema de detección de leucocitos POCT basado en tarjetas utiliza el principio de impedancia eléctrica para detectar leucocitos y su distribuciónde volumen 15,16. Aprovechando la diferencia de conductividad eléctrica entre las células sanguíneas y las soluciones electrolíticas, cuando las células sanguíneas con diferentes tamaños de volumen pasan a través del orificio de conteo, puede causar cambios en la corriente o el voltaje dentro y fuera del orificio, formando un voltaje de pulso. Este voltaje de pulso es comparable al número de células sanguíneas y corresponde al tamaño del volumen, distinguiendo así indirectamente grupos de células sanguíneas y contándolos por separado. Se debe prestar atención a varios pasos críticos en la detección de leucocitos utilizando el analizador evaluado, que está estrechamente relacionado con la precisión de los resultados de la prueba. Primero, al recolectar sangre, la primera gota de sangre debe limpiarse con un hisopo seco estéril, ya que puede contener exceso de líquido tisular que puede afectar los resultados de la prueba. En segundo lugar, después de recolectar la segunda gota de sangre con un tubo capilar, la sangre unida al exterior del tubo debe limpiarse para garantizar que el volumen de la muestra de sangre recolectada sea exactamente de 5 μ L.In además, las muestras de sangre y los reactivos hemolíticos deben mezclarse completamente. Al mismo tiempo, asegúrese de que todas las soluciones estén completamente comprimidas en el módulo de detección de células sanguíneas.
Debido a sus ventajas sobresalientes, que incluyen bajo costo, operación simple, ser rápido y estar libre de mantenimiento diario, este sistema POCT es muy adecuado para su uso en centros ambulatorios o unidades médicas primarias, lo que es un complemento importante para la aplicación clínica actual4. La aplicación de este sistema puede cubrir el examen de rutina de sangre en todas las instituciones médicas primarias en todas las áreas en desarrollo de China y tiene una importancia clínica importante para la detección temprana de enfermedades, especialmente enfermedades infecciosas y enfermedades de la sangre17,18. Sin embargo, una limitación importante es que los leucocitos solo se pueden dividir en tres categorías (neutrófilos, linfocitos, células intermedias). En el futuro, la capacidad de clasificación del sistema debe mejorarse aún más para lograr el propósito de un diagnóstico preciso.
En conclusión, como un nuevo equipo de análisis de leucocitos, el analizador de leucocitos POCT tiene las ventajas de ser portátil, de bajo costo, fácil operación, detección rápida y precisa; exhibe una buena correlación, una consistencia sólida y una comparación confiable con el analizador automático de hematología ampliamente utilizado en las clínicas y, por lo tanto, es adecuado para su uso en unidades médicas primarias.
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Disclosures
Los autores no tienen nada que revelar.
Acknowledgments
Este estudio fue apoyado por la Fundación de Investigación Científica Médica de la provincia de Guangdong, China (A2019224). Los grupos de financiación estuvieron de acuerdo con el diseño del estudio, el análisis de datos, la preparación del manuscrito y la decisión de publicar. No se recibió ningún otro financiamiento para este estudio.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Blood cell detection module | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Blood lancet | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Hemolytic reagent | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| IBM SPSS Statistics 25 | International Business Machines Corp., Armonk, NY | Software for data analysis | |
| MedCalc 11.4.2.0 | 2021 MedCalc Software Ltd | Software for data analysis | |
| Microsoft Excel 2019 | Microsoft | Software for data analysis | |
| Point-of-care testing (POCT) card-based leukocyte analyzer | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | CX-2000 | Evaluated system |
| Quantitative pipette with capillary tube inside | Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) | consumables for evaluated system | |
| Siemens fully automatic hematology analyzer and its related reagents and consumables | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | ADVIA 2120i | Reference system 2 |
| UniCel DxH 800 Coulter Cellular Analysis System and its related reagents and consumables | Beckman Coulter, Inc. | DxH 800 | Reference system 1 |
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