Muestreo de sangre de la vena subclavia en ratas conscientes

Resumen

Aquí presentamos una combinación de métodos efectivos de restricción en ratas y punción de la vena subclavia que permiten la recolección de sangre rápida, segura y repetida en ratas sin anestesia.

Resumen

Existen varios métodos establecidos para obtener muestras de sangre repetidas de ratas, siendo los métodos más comúnmente empleados el muestreo de la vena lateral de la cola sin anestesia y el muestreo de la vena yugular con anestesia. Sin embargo, la mayoría de estos métodos requieren asistencia y equipo anestésico y, en ocasiones, plantean dificultades en cuanto a la extracción de sangre o la mala calidad de las muestras de sangre. Además, estos métodos de extracción de sangre consumen mucho tiempo y recursos humanos cuando se requiere la toma repetida de muestras de sangre para un gran número de ratas. Este estudio presenta una técnica para la toma repetitiva de muestras de sangre en ratas no anestesiadas por un solo individuo competente. Se pueden obtener muestras de sangre altamente satisfactorias mediante la punción de la vena subclavia. El método demostró una impresionante tasa de éxito general del 95%, con una mediana de tiempo de solo 2 minutos desde la sujeción de la rata hasta la finalización de la extracción de sangre. Además, realizar recolecciones de sangre consecutivas dentro del rango designado no inflige ningún daño a las ratas. Vale la pena promover este método para la recolección de sangre, especialmente en estudios farmacocinéticos a gran escala.

Introducción

Las ratas son uno de los animales de experimentación más comunes, y hay muchas formas de obtener muestras de sangre. En el caso de los experimentos que impliquen una sola extracción de sangre en la fase final, se puede obtener una cantidad suficiente de sangre mediante punción cardíaca o extracción de sangre de la aorta abdominal¹. Sin embargo, algunos estudios requieren la recolección repetida de sangre de ratas para análisis de sangre o bioquímicos de rutina, especialmente en estudios de farmacocinética y toxicología, donde se requiere la recolección repetida de sangre para determinar la absorción, distribución y metabolismo de los medicament....

Protocolo

Este estudio se adhirió a las directrices trazadas en la 8ª edición de la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio¹³. La investigación recibió la aprobación del Comité de Ética del Segundo Hospital de la Universidad de Lanzhou y se documentó el cumplimiento de las directrices ARRIVE 2.0¹⁴. Doce ratas Wistar sanas (seis machos con un peso de 290-330 g y seis hembras con un peso de 250-280 g) de entre 12 y 16 semanas de edad se alojaron en el Laboratorio de Animales GLP de la Universidad de Lanzhou durante 3 días antes del experimento real. Las jaulas para ratas utilizadas eran del tipo R5, de 545 mm x 395 mm ....

Resultados

Las muestras de plasma de alta calidad exhiben un tono, claridad y transparencia de color amarillo pálido, desprovistos de cualquier tinte rojo o coagulación, como se muestra en la Figura 2A. La Figura 2B muestra hemólisis (lado izquierdo) o coagulación (lado derecho) como resultado de procedimientos inadecuados, respectivamente. En el transcurso de 96 sesiones de extracción de sangre en 4 días, los tiempos promedio de extracción de sangre para los grupos

Discusión

Aunque la extracción de sangre de la vena de la cola es el método más común para la toma repetida de muestras de sangre en ratas, podría estar influenciado por los fármacos anestésicos y, debido al pequeño tamaño de la vena de la cola, la cantidad de sangre que se puede recolectar en una sola instancia es limitada, lo que lleva a una mayor duración de la recolección de sangre ^4,5. Aunque los sistemas de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y espectrome.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
0.75% solución salina normal	Gansu Fuzheng Pharmaceutical Technology Co., Ltd.	— —	Solución preparada de heparina sódica
1 mL de pipeta Pasteur	Biosharp	BS-XG-01-NS	Jeringa de extracción de sangre
de 1 mL (26 G, 0,45 mm x 12 mm)	Shinva Medical Instrument Co.,Ltd.	0.45 * 12RWLB	Recolección de sangre
Tubo Eppendorf de 1,5 ml	Biosharp	BS-15-M	Almacenamiento y recolección de sangre
75% alcohol medicinal	Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.	— —	Desinfección del sitio de recolección de sangre de ratas
Soporte de tubo de centrífuga	Biosharp	BS-05/15-SM60	— —
Báscula electrónica	Shanghai PUCHUN Measure Instrument Co., Ltd.	JE1002	Peso
Inyección de heparina sódica	Hebei Changshan Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd.	— —	Enjuague la jeringa y el tubo electropropeatorizador; diluya con solución salina normal hasta 25 U/mL
Centrífuga de baja temperatura	HuNan Xiang Yi Centrífuga Instrument  Co., Ltd.	H1750R	Separación de suero