Die Herstellung der thermoplastischen Mikrofluidikkanälen

Summary

Hier zeigen wir, wie thermoplastische Mikrofluidik-Chips mit Heißprägen und Wärmeversiegelung herzustellen. Dann werden wir zeigen, wie man in situ Licht gerichtet Oberflächenpfropfung und Polymerisation durch die versiegelten Chip verwenden, um den Verbund Festphase Spalten bilden.

Abstract

In unserem Labor haben wir erfolgreich Nukleinsäuren direkt von Mikroliter-und Submikroliter Mengen von menschlichem Blut, Urin und Stuhl unter Verwendung von Polymer / Nanopartikel-Composite mikroskaligen Lyse und Festphasenextraktion Säulen isoliert. Die gewonnene Proben konzentriert, kleinen Probenvolumina, dass PCRable werden, ohne zusätzliche Aufräumarbeiten. Hier zeigen wir, wie thermoplastische Mikrofluidik-Chips mit Heißprägen und Wärmeversiegelung herzustellen. Dann zeigen wir, wie man in situ Licht gerichtet Oberflächenpfropfung und Polymerisation durch die versiegelten Chip verwenden, um den Verbund Festphase Spalten bilden. Wir zeigen, Pfropfen und Polymerisation von einem Kohlenstoff-Nanoröhrchen / Polymer-Verbundstoff Spalte für die bakterielle Zell-Lyse. Wir zeigen dann die Lyse-Prozess durch Festphasen Extraktion von Nukleinsäuren aus der Probe auf dem Chip mit einem Silica / Polymer-Verbundstoff-Säule. Die beigefügte Protokolle enthalten detaillierte Anweisungen, wie Sie beide Lyse und Festphasenextraktion Spalten zu machen.

Protocol

Die mikrofluidischen Kanälen sind in einem zyklischen Polyolefin (Zeonex ® 690R, Zeon Chemical Inc., Louisville, KY) hergestellt. Zeonex hat eine Glasübergangstemperatur (T g) von 136 ° C und ist UV-durchlässig, das ist wichtig für das Licht gerichtet Chemie in die poröse Monolith Bildung verwendet. Die Mikrokanäle werden durch Mikro-Heißprägen mit einem NiCo elektrogeformte Master-Form, die die negative (inverse) Merkmale des mikrofluidischen Plattform hergestellt. Das Heißprägen wird wie folgt d…