Este protocolo describe el proceso para inducir un modelo de coma isquémico cerebral utilizando un método de oclusión modificado de cuatro vasos.
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Artículo de método
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Este protocolo describe el proceso para inducir un modelo de coma isquémico cerebral utilizando un método de oclusión modificado de cuatro vasos.
El coma por isquemia cerebral es la complicación más grave de la isquemia cerebral. La oclusión de cuatro vasos puede establecer un modelo de coma isquémico cerebral para la investigación de enfermedades y el desarrollo de fármacos. Sin embargo, el método de oclusión de cuatro vasos comúnmente utilizado consiste principalmente en insertar una pluma de electrocoagulación en el agujero pterigoideo bilateral de la primera vértebra cervical detrás del cuello para electrocoagular las arterias vertebrales. Este proceso conlleva el riesgo de electrocoagulación incompleta, sangrado y daño al tronco encefálico y la médula espinal. Veinticuatro horas después de la cirugía, las ratas reanestesiadas se someten a una ligadura de la arteria carótida por delante del cuello. Dos cirugías exponen a las ratas a un mayor riesgo de infección y aumentan el período experimental. En este estudio, durante un solo procedimiento quirúrgico, se utilizó una incisión cervical anterior para localizar el sitio clave donde la arteria vertebral penetra en la primera vértebra cervical. Las arterias vertebrales bilaterales se electrocauterizaron en condiciones visuales, mientras que las arterias carótidas comunes bilaterales se separaron para colocar nudos sueltos. Cuando las extremidades de las ratas comenzaron a temblar, las arterias carótidas comunes bilaterales se ligaron rápidamente para inducir el coma isquémico. Este método puede evitar el riesgo de infección causado por dos operaciones quirúrgicas y es fácil de realizar con una alta tasa de éxito, proporcionando una referencia útil para los profesionales relevantes.
El daño cerebral isquémico es la lesión cerebral más común en la práctica clínica, representando aproximadamente el 75% de los casos de enfermedad cerebrovascular. La isquemia puede conducir a lesiones y enfermedades cerebrales secundarias graves 1,2, y el coma es el síntoma más grave causado por la lesión cerebral hipóxica isquémica. También es el camino final para muchas condiciones críticas3. El coma es una enfermedad crítica y grave en la práctica clínica de difícil manejo4. Cuanto más dure el coma, mayor será el peligro pote....
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El protocolo experimental se llevó a cabo de acuerdo con los requisitos del Comité de Uso de Animales de Laboratorio y del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad de Foshan (Número de registro: 2023-643656). Para este estudio se utilizaron ratas macho Sprague Dawley (SD) (200 g ± 20 g, de 6 a 8 semanas de edad). Todos los datos de investigación con animales se han redactado de acuerdo con las directrices ARRIVE (Animal Research: Reporting In Vivo Experiments). Los detalles de los reactivos y equipos utilizados en el estudio se enumeran en la Tabla de Materiales.
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Debido a la inflamación y otros estímulos causados por la implantación de electrodos, el EEG puede ser inestable, por lo que las ratas necesitan recuperarse durante 3 días. Las ratas con EEG y EMG normales después de 3 días podrían incluirse para la preparación del modelo de coma. Cuando las ratas fueron anestesiadas, la actividad de EEG y EMG se suprimió ligeramente, pero procedió sin problemas. No hubo cambios significativos en la actividad del EEG y EMG después de la electrocoagulación que bloqueó los AV bilaterales. .......
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La oclusión de cuatro vasos induce una lesión cerebral isquémica e hipóxica global, que puede simular un coma agudo, un paro cardíaco, asfixia, shock, arritmia grave y otras condiciones clínicas críticas causadas por la isquemia cerebral en la práctica clínica. Por su parte, la oclusión de cuatro vasos puede provocar daños principalmente en el hipocampo17,18, que es el área funcional principal del cerebro responsable de la memori.......
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Los autores no tienen nada que revelar.
Este trabajo contó con el apoyo de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (82173781 y 82373835), el proyecto de investigación postdoctoral (BKS212055), el Proyecto de Innovación Científica y Tecnológica de la Oficina de Ciencia y Tecnología de Foshan (2320001007331), la Fundación de Investigación Básica y Aplicada de Guangdong (2019A1515010806), los Proyectos de Campo Clave (Fabricación Inteligente) de las Universidades Generales de la Provincia de Guangdong (2020ZDZX2057) y los Proyectos de Investigación Científica (Innovación Característica) de General Universidades en la provincia de Guangdong (2019KTSCX195).
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Matriz de fotoelectrodos de microfibra de 16 canales | Jiangsu Yige Biotechnology Co., Ltd | 2605 | |
| 4-0 Sutura quirúrgica | Nantong Holycon Medical Devices Co., Ltd. | B-104 | |
| 6-0 Sutura quirúrgica | Ningbo MEDICAL Needle Co., Ltd. | JM1216-742417 | |
| Electrodo de EEG | Kedou Brain machine Technology Co., Ltd | KD-EEGEMG | |
| Pluma de electrocoagulación | CONPUVON Company | 465 | |
| Lunion Stage Automatic Sleep Staging System | Shanghai Lulian Intelligent Technology Co., Ltd. | 1336 | |
| Taladro de cráneo de mano en miniatura | Rayward Life Technology Co., Ltd | 87001 | |
| Penicilina sódica | Chengdu Kelong Chemical Co., Ltd. | 17121709-2 | |
| SD ratas | SPF ( Pekín ) Biotecnología Co., Ltd. | 180-220g | |
| Clavo de calavera | GLOBALEBIO,LTD | / | |
| Instrumento estereotáxico | Rayward Life Technology Co., Ltd | 68801 | |
| Zoletil 50 | Vic Trading (Shanghai) Co., LTD | BN 88SHA |
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