This content is Free Access.
Capítulos
- 00:05Título
- 00:39Cell Culture for Immunofluorescence Microscopy
- 01:32Preparation of Transfection Complex and Transfection of Cells
- 03:08Live Cell Imaging and Indirect Immunofluorescence
- 05:40Results: Identifying Kinesin Cargo via Fluorescence Microscopy
- 06:50Conclusion
Ici, un protocole est présenté pour identifier Kinesin-1 cargaisons. Un mutant sans moteur du Kinesin-1 chaîne lourde (KIF5B) agrège dans le cytoplasme et induit une agrégation de ses cargaisons. Les deux granulats sont détectés au microscope à fluorescence. Une stratégie similaire peut être utilisée pour identifier d'autres protéines cargos à moteur.
Tags
Kinesin-1CargosFluorescence MicroscopyMolecular MotorsDominant Negative KIF5B MutantsLive Cell ImagingIndirect Fluorescence ImagingImmunofluorescent StudiesCover GlassesCell CultureTransfection MediumTdTomato-tagged Wild Type KIF5B Expression PlasmidMotorless KIF5B Expression PlasmidCandidate Cargo Protein
