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Entità DI legame SUMO (SUBE) come strumenti per l'arricchimento, l'isolamento, l'identificazione e la caratterizzazione del proteoma SUMO nel cancro al fegato
JoVE Revista
Bioquímica
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JoVE Revista Bioquímica
SUMO-Binding Entities (SUBEs) as Tools for the Enrichment, Isolation, Identification, and Characterization of the SUMO Proteome in Liver Cancer
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Entità DI legame SUMO (SUBE) come strumenti per l'arricchimento, l'isolamento, l'identificazione e la caratterizzazione del proteoma SUMO nel cancro al fegato

DOI:
10.3791/60098-v

•

08:29 min

•

November 01, 2019

•

, , , , , ,
1Liver Disease and Liver Metabolism Lab,CIC bioGUNE, Centro de Investigación Biomédica en Red de Enfermedades Hepáticas y Digestivas (CIBERehd), 2Proteomics Platforms,CIC bioGUNE, ProteoRED-ISCIII, CIBERehd, 3Advanced Technology Institute in Life Sciences (ITAV)-CNRS-IPBS,UbiCARE

Capítulos

  • 00:04Título
  • 01:58Cell Preparation and Lysis
  • 03:27Tissue Preparation and Lysis
  • 03:54Binding of GST-SUBEs or GST Control to Glutathione-Agarose Beads
  • 04:52GST Pull Down Assay
  • 05:59Identification and Characterization of SUMO Targets
  • 06:36Results: Western Blot and Mass Spectrometry Analysis
  • 07:33Conclusion

Summary

Traducción Automática

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Qui, presentiamo un protocollo per arricchire, isolare, identificare e caratterizzare le proteine modificate da SUMO in vivo sia da cellule umano di epatoma e tumori del fegato ottenuti da modelli murini di carcinoma epatocellulare utilizzando entità leganti SUMO (SUBE).

Tags

Keywords: SUMO-binding EntitiesSUBEsSUMO ProteomeLiver CancerSUMOylationProtein IsolationProtein CharacterizationProteaseTandem RepeatsSIMsTherapeutic ApproachHuman Hepatoma CellsCell LysisTrypsinization

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