Summary

侵害受容性および炎症性メディエーターの組織特異的な測定のためのヒトのin vivoバイオアッセイ

Published: December 01, 2008
doi:

Summary

技術は、痛みや炎症を介在する生化学物質の測定のための適切な組織のサイト(ここで、実験的に炎症を起こしている皮膚)から間質液サンプルの生体内のコレクションのために提示されます。

Abstract

この生体内のヒトバイオアッセイは、ヒトのボランティアと患者を研究するために使用することができます。サンプルは、無菌的に挿入した微小透析カテーテル(皮膚透析、エルランゲン、ドイツ)を経由して皮膚などの関連する組織のサイトから収集されます。この例に示すようにヒトのボランティアで実験的に炎症を起こしている皮膚から間質液のコレクションです。サンプルのコレクションは、他の実験的なテストと組み合わせることができます。例えば、局所的に放出さ生化学および実験的に炎症を起こしている皮膚の痛みを伴う刺激に対する主観的な感度の同時評価は、痛みや炎症のバイオマーカーを識別するための重要な生化学的、行動的リンクを提供しています。生きている人間の生体に提示アッセイは、疼痛および/または炎症の基礎となる組織特異的なプロセスへの機械的な洞察が可能になります。このような新薬候補として – – 痛みおよび/または炎症性状態の治療をターゲッティング法もよく、既存または新規の介入の有効性を調べるために適しています。この記事では、人間の被験者の実験的炎症を起こしている皮膚の病変から間質液を収集するためのマイクロダイアリシス技術の使用に関する詳細な説明を提供します。間質液のサンプルは、通常、50マイクロリットルのようなボリュームのような小さなサンプルで100検体までアッセイすることが可能マルチプレックスビーズアレイのイムノアッセイの助けを借りて処理されます。

Protocol

実験的な炎症の誘導: 第一度日焼けはキャリブレーション、紫外線Bのソース(SaalmannマルチテスターSBB LT 499、Saalmann社、ヘレフォード、ドイツ)の助けを借りて、太ももの非日焼けした肌に誘導される。日焼けは、露出した皮膚の完全な発赤、または3回最小限の紅斑量(MED)を引き起こすために必要なUVB光線の3倍を適用することにより、マイクロダイアリシス実験を開始する前に24?…

Discussion

微小透析技術と多重イムノアッセイ技術の併用は、関心のある組織の生化学的事象についての洞察を提供する人間のバイオアッセイ、in vivoで、リアルタイムの貴重なものです。このような痛みのテストのような行動テストと組み合わせることで、方法は痛みや炎症を介在する生化学物質の複雑な相互作用を研究することができます。方法は、末梢組織病理で炎症と慢性疼痛の条件の病理にメカニズムの洞察…

Divulgations

The authors have nothing to disclose.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Microdialysis catheter Tool Dermal Dialysis NA  
Pump 22 Tool Harvard Apparatus 552219  
Saalmann Multitester SBB LT 400 Tool Saalmann GmbH NA  
RM-12 IP-65 Radiometer Tool Dr. Grobel UV Elektronik GmbH 82120000/81112100  
Complete Proteinase Inhibitor Reagent Roche Bioscience 11836145001  
Microcent tube Tool E&K Scientific 380150-X  
Albumin 5% Reagent ZLB Behring NA  
Lactated Ringer Reagent Hospira Inc NA  
Xylocaine-MPF Other Astra Zeneca NA  
Syringe 1mL Tool Becton Dickinson Co 309602  

References

  1. Angst, M. S., Clark, J. D., Carvalho, B., Tingle, M., Schmelz, M., Yeomans, D. C. Cytokine profile in human skin in response to experimental inflammation, noxious stimulation and administration of a COX-inhibitor: A microdialysis study. Pain. 139, 15-27 (2008).
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Citer Cet Article
Angst, M. S., Tingle, M., Schmelz, M., Carvalho, B., Yeomans, D. C. Human In-Vivo Bioassay for the Tissue-Specific Measurement of Nociceptive and Inflammatory Mediators. J. Vis. Exp. (22), e1074, doi:10.3791/1074 (2008).

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