हम इस प्रोटोकॉल में प्रदर्शित कैसे चूहों में पुरानी electrophysiological रिकॉर्डिंग के लिए एक सूक्ष्म ड्राइव सरणी बनाना.
न्यूरॉन्स की बड़ी आबादी के लगातार रिकॉर्डिंग जाग बर्ताव चूहों में neuronal सर्किट के समारोह के अध्ययन के लिए एक महत्वपूर्ण तकनीक है. लाइटवेट रिकॉर्डिंग tetrodes के एक उच्च घनत्व सरणी ले उपकरणों व्यक्तिगत न्यूरॉन्स के सैकड़ों के लिए दसियों की गतिविधि के साथ – साथ निगरानी के लिए अनुमति देते हैं. यहाँ हम बीस एक स्वतंत्र चल सूक्ष्म ड्राइव के साथ एक सूक्ष्म ड्राइव सरणी के निर्माण के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन. इस डिवाइस को सफलतापूर्वक इस्तेमाल किया गया है करने के लिए हमारी प्रयोगशाला में hippocampal और cortical न्यूरॉन्स से रिकॉर्ड. हम बताते हैं कि कैसे तैयार करने के लिए एक कस्टम डिजाइन, 3 – डी मुद्रित प्लास्टिक आधार है कि सूक्ष्म ड्राइव का आयोजन करेगा. हम कैसे व्यक्ति माइक्रो ड्राइव का निर्माण करने के लिए और कैसे पूरा सूक्ष्म ड्राइव सरणी इकट्ठा करने के लिए प्रदर्शित. शल्य आरोपण के लिए ड्राइव सरणी, tetrodes के निर्माण जैसे ड्राइव सरणी और सोना चढ़ाना में tetrodes की लोडिंग के आगे तैयारी बाद में एक वीडियो लेख में कवर किया जाता है.
इस प्रोटोकॉल माइक्रो ड्राइव निर्माण की प्रक्रिया के सामान्य सुविधाओं का वर्णन करता है. यह सफलतापूर्वक किया गया है के लिए एकाधिक रिकॉर्डिंग लक्ष्य या छोटे चूहों में रिकॉर्डिंग के लिए arrays के साथ ड्राइव …
हम स्वीकार करते हैं लीनुस डी. सूर्य और Jeenah जंग, जो चूहों से रिकॉर्डिंग के लिए कंप्यूटर डिजाइन, 3 – डी हमारी प्रयोगशाला में मुद्रित ड्राइव का उपयोग उत्पन्न करना चाहते हैं. इसके अलावा, हम माइक्रो ड्राइव और tetrode प्रयोगशाला में प्रौद्योगिकी विकास के लिए उनके योगदान के लिए सब अतीत और वर्तमान विल्सन लैब के सदस्यों को स्वीकार करना चाहते हैं.
3D-printed plastic parts | Material | American Precision Prototyping (www.approto.com) | Parts are printed by stereolithography (SLA) using DSM 14120 ‘ABS-like’, DSM 11120 ‘Watershed’ or Accura 55 resins. Request high resolution, no sandblasting. | |
stainless steel tubing | Material | Small Parts (www.smallparts.com) | Cut to custom length and deburred. Sizes: 13 Ga (1pc @ 10 mm), 15 Ga (1pc @ 50 mm), 20 Ga thin wall (21pcs @ 5 mm), 23 Ga (21pcs @ 14 mm) | |
Dental cement powder | Material | A-M Systems (www.a-msystems.com) | 525000 | |
Dental cement solvent | Material | A-M Systems | 526000 | |
Electrode interface board | Material | Neuralynx (www.neuralynx.com) | EIB-81 | |
micro-drive screws | Material | Advanced Machining and Tooling (www.amtmfg.com) | Custom made screws with M1.2×0.25 threads (1.2mm major diameter; 0.25 mm thread pitch) | |
‘Tap-Ease’ tapping lubricant | Tool | AGS Company | TA-2 | Available from MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) |
Polyimide tubing | Material | IWG High Performance Conductors (www.iwghpc.com) | Sizes: 30 Ga (outer diam: 0.0071″, inner diam: 0.0116″) 5 mil (nominal outer diam: 0.0055″, wall: 0.0010″) | |
Cordless drill/driver | Tool | DeWalt (www.dewalt.com) | DC750KA | Any drill/driver with low-speed setting will do. |
Variable-Speed Rotary Tool Kit with Flex-Shaft | Tool | Dremel (www.dremel.com) | 3956-02 | |
Razor blades | Tool | VWR (www.vwr.com) | 55411-050 | |
Watch glass | Tool | VWR | 66112-107 | |
Tap for custom screws | Tool | Balax | 01302 | M1.2×0.25 Thredfloer thread-forming tap. Available from MSC Industrial Supply. |
Taps | Tool | Small Parts | HSBT-0172, HSBT-0080 | 1-72, 0-80 bottoming taps |
Pin vise | Tool | Vargus | 3SHC1–I | To hold taps. Available from MSC Industrial Supply |
Drill bits | Tool | Small Parts | Sizes: 65, 61, 1.55mm | |
Benchtop vise | Tool | Panavise | 301 | Available from DigiKey (www.digikey.com). |
No.2 Dumont forceps | Tool | Stoelting (www.stoeltingco.com) | 52100-27 | Used for inserting 20 Ga thin wall sleeves. |
5-minute epoxy | Tool | Allied Electronics (www.alliedelec.com) | ||
Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (www.aveninc.com) | 18768 (Pattern 304) | Used for handling polyimide tubing. |
Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments (www.biomedinstr.com) | 25-1000 | Used for cutting polyimide carrier tubes |
Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | Used for handling stainless steel tubing and for construction of custom screwdriver. |
mini pin vise | Tool | MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) | 00920314 | Used as a handle for custom made screwdriver. |