Micro-drive Array para Crônica In vivo: Fabricação Unidade
Summary
Neste protocolo, demonstramos como fabricar uma matriz de unidade de micro-crônica para gravações eletrofisiológicas em ratos.
Abstract
Gravação de crônicas de grandes populações de neurônios é uma técnica valiosa para estudar a função dos circuitos neuronais em ratos acordados comportando. Dispositivos de gravação leve carregando um conjunto de alta densidade de tetrodes permitir o monitoramento simultâneo da atividade de dezenas a centenas de neurônios individuais. Aqui nós descrevemos um protocolo para a fabricação de uma matriz de unidade-micro com 21 independentemente móveis micro-drives. Este dispositivo tem sido usado com sucesso para gravar a partir de neurônios do hipocampo e cortical em nosso laboratório. Vamos mostrar como preparar um design personalizado, 3-D de base impressa de plástico que conterá o micro-drives. Demonstramos como construir o indivíduo micro-unidades e como montar a matriz drive-micro completo. De preparação da matriz unidade para implantação cirúrgica, tal como a fabricação de tetrodes, carregamento de tetrodes na unidade matriz eo excesso de regulamentação, é coberto em um artigo de vídeo subseqüentes.
Protocol
Discussion
Este protocolo descreve as características gerais do processo de construção micro-drive. Foi com sucesso modificado para produzir matrizes de unidade com metas de gravação múltipla ou matrizes menores para gravações em camundongos. Além da gravação do hipocampo, muitos pesquisadores usam essas unidades para atingir estruturas corticais e sub-cortical. O uso de parafusos mais longos podem ser necessários, a fim de gravar a partir de estruturas mais profundas do cérebro. Com uma ampla modificação na base da…
Acknowledgements
Gostaríamos de agradecer Linus D. Sol e Jeenah Jung, que originou o uso do computador projetado, 3-D unidades impressas em nosso laboratório para a gravação de ratos. Além disso, gostaríamos de agradecer todos os membros Lab passado e do presente Wilson por suas contribuições para micro-drive e desenvolvimento tetrode tecnologia no laboratório.
Materials
| 3D-printed plastic parts | Material | American Precision Prototyping (www.approto.com) | Parts are printed by stereolithography (SLA) using DSM 14120 ‘ABS-like’, DSM 11120 ‘Watershed’ or Accura 55 resins. Request high resolution, no sandblasting. | |
| stainless steel tubing | Material | Small Parts (www.smallparts.com) | Cut to custom length and deburred. Sizes: 13 Ga (1pc @ 10 mm), 15 Ga (1pc @ 50 mm), 20 Ga thin wall (21pcs @ 5 mm), 23 Ga (21pcs @ 14 mm) | |
| Dental cement powder | Material | A-M Systems (www.a-msystems.com) | 525000 | |
| Dental cement solvent | Material | A-M Systems | 526000 | |
| Electrode interface board | Material | Neuralynx (www.neuralynx.com) | EIB-81 | |
| micro-drive screws | Material | Advanced Machining and Tooling (www.amtmfg.com) | Custom made screws with M1.2×0.25 threads (1.2mm major diameter; 0.25 mm thread pitch) | |
| ‘Tap-Ease’ tapping lubricant | Tool | AGS Company | TA-2 | Available from MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) |
| Polyimide tubing | Material | IWG High Performance Conductors (www.iwghpc.com) | Sizes: 30 Ga (outer diam: 0.0071″, inner diam: 0.0116″) 5 mil (nominal outer diam: 0.0055″, wall: 0.0010″) | |
| Cordless drill/driver | Tool | DeWalt (www.dewalt.com) | DC750KA | Any drill/driver with low-speed setting will do. |
| Variable-Speed Rotary Tool Kit with Flex-Shaft | Tool | Dremel (www.dremel.com) | 3956-02 | |
| Razor blades | Tool | VWR (www.vwr.com) | 55411-050 | |
| Watch glass | Tool | VWR | 66112-107 | |
| Tap for custom screws | Tool | Balax | 01302 | M1.2×0.25 Thredfloer thread-forming tap. Available from MSC Industrial Supply. |
| Taps | Tool | Small Parts | HSBT-0172, HSBT-0080 | 1-72, 0-80 bottoming taps |
| Pin vise | Tool | Vargus | 3SHC1–I | To hold taps. Available from MSC Industrial Supply |
| Drill bits | Tool | Small Parts | Sizes: 65, 61, 1.55mm | |
| Benchtop vise | Tool | Panavise | 301 | Available from DigiKey (www.digikey.com). |
| No.2 Dumont forceps | Tool | Stoelting (www.stoeltingco.com) | 52100-27 | Used for inserting 20 Ga thin wall sleeves. |
| 5-minute epoxy | Tool | Allied Electronics (www.alliedelec.com) | ||
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (www.aveninc.com) | 18768 (Pattern 304) | Used for handling polyimide tubing. |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments (www.biomedinstr.com) | 25-1000 | Used for cutting polyimide carrier tubes |
| Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | Used for handling stainless steel tubing and for construction of custom screwdriver. |
| mini pin vise | Tool | MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) | 00920314 | Used as a handle for custom made screwdriver. |
References
- Yamamoto, J., Wilson, M. A. Large-scale chronically implantable precision motorized microdrive array for freely behaving animals. J. Neurophysiol. 100 (4), 2430-2440 (2008).
