Micro-array de unidades de crónicos In vivo Grabación: Unidad de Fabricación
Summary
En este protocolo, se muestra cómo fabricar una serie de micro-disco de crónica registros electrofisiológicos en las ratas.
Abstract
Grabación crónica de grandes poblaciones de neuronas es una técnica valiosa para el estudio de la función de los circuitos neuronales en ratas comportándose despierto. Dispositivos ligeros de grabación que lleva un conjunto de alta densidad de tetrodos permitir el control simultáneo de la actividad de decenas a cientos de neuronas individuales. Aquí se describe un protocolo para la fabricación de un arsenal de la micro-drive con veintiún independiente móviles micro-unidades. Este dispositivo ha sido utilizado con éxito para grabar desde las neuronas del hipocampo y la corteza de nuestro laboratorio. Se muestra cómo preparar un diseño personalizado, en 3-D base de plástico impreso que contendrá los discos micro-. Demostramos cómo construir las micro-unidades y la forma de montar el total de micro-array de unidades. Una mayor preparación de la unidad matriz de implante quirúrgico, como la fabricación de tetrodos, la carga de tetrodos en la matriz unidad y oro chapado, es analizada en un artículo posterior de vídeo.
Protocol
Discussion
Este protocolo describe las características generales del proceso de construcción de micro-drive. Se ha modificado con éxito para producir los arrays de unidades con las metas de grabación de múltiples matrices o menor para las grabaciones en los ratones. Además de la grabación del hipocampo, muchos investigadores utilizan estas unidades al objetivo de las estructuras corticales y subcorticales. El uso de tornillos más largos puede ser necesario a fin de registrar a partir de las estructuras cerebrales más prof…
Acknowledgements
Queremos agradecer a D. Lino Sol y Jung Jeenah, que se originó el uso de equipo de diseño en 3-D unidades impresas en nuestro laboratorio para la grabación de los ratones. Además, nos gustaría agradecer a todos los miembros de Wilson pasado y el presente de laboratorio, por sus contribuciones a la micro-drive y el desarrollo de la tecnología tetrodo en el laboratorio.
Materials
| 3D-printed plastic parts | Material | American Precision Prototyping (www.approto.com) | Parts are printed by stereolithography (SLA) using DSM 14120 ‘ABS-like’, DSM 11120 ‘Watershed’ or Accura 55 resins. Request high resolution, no sandblasting. | |
| stainless steel tubing | Material | Small Parts (www.smallparts.com) | Cut to custom length and deburred. Sizes: 13 Ga (1pc @ 10 mm), 15 Ga (1pc @ 50 mm), 20 Ga thin wall (21pcs @ 5 mm), 23 Ga (21pcs @ 14 mm) | |
| Dental cement powder | Material | A-M Systems (www.a-msystems.com) | 525000 | |
| Dental cement solvent | Material | A-M Systems | 526000 | |
| Electrode interface board | Material | Neuralynx (www.neuralynx.com) | EIB-81 | |
| micro-drive screws | Material | Advanced Machining and Tooling (www.amtmfg.com) | Custom made screws with M1.2×0.25 threads (1.2mm major diameter; 0.25 mm thread pitch) | |
| ‘Tap-Ease’ tapping lubricant | Tool | AGS Company | TA-2 | Available from MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) |
| Polyimide tubing | Material | IWG High Performance Conductors (www.iwghpc.com) | Sizes: 30 Ga (outer diam: 0.0071″, inner diam: 0.0116″) 5 mil (nominal outer diam: 0.0055″, wall: 0.0010″) | |
| Cordless drill/driver | Tool | DeWalt (www.dewalt.com) | DC750KA | Any drill/driver with low-speed setting will do. |
| Variable-Speed Rotary Tool Kit with Flex-Shaft | Tool | Dremel (www.dremel.com) | 3956-02 | |
| Razor blades | Tool | VWR (www.vwr.com) | 55411-050 | |
| Watch glass | Tool | VWR | 66112-107 | |
| Tap for custom screws | Tool | Balax | 01302 | M1.2×0.25 Thredfloer thread-forming tap. Available from MSC Industrial Supply. |
| Taps | Tool | Small Parts | HSBT-0172, HSBT-0080 | 1-72, 0-80 bottoming taps |
| Pin vise | Tool | Vargus | 3SHC1–I | To hold taps. Available from MSC Industrial Supply |
| Drill bits | Tool | Small Parts | Sizes: 65, 61, 1.55mm | |
| Benchtop vise | Tool | Panavise | 301 | Available from DigiKey (www.digikey.com). |
| No.2 Dumont forceps | Tool | Stoelting (www.stoeltingco.com) | 52100-27 | Used for inserting 20 Ga thin wall sleeves. |
| 5-minute epoxy | Tool | Allied Electronics (www.alliedelec.com) | ||
| Accu-Tek Carbofib Tip Tweezers | Tool | Aven (www.aveninc.com) | 18768 (Pattern 304) | Used for handling polyimide tubing. |
| Micro Dissecting Scissors | Tool | Biomedical Research Instruments (www.biomedinstr.com) | 25-1000 | Used for cutting polyimide carrier tubes |
| Xcelite 378M Pliers | Tool | Newark | 96F8903 | Used for handling stainless steel tubing and for construction of custom screwdriver. |
| mini pin vise | Tool | MSC Industrial Supply (www.mscdirect.com) | 00920314 | Used as a handle for custom made screwdriver. |
References
- Yamamoto, J., Wilson, M. A. Large-scale chronically implantable precision motorized microdrive array for freely behaving animals. J. Neurophysiol. 100 (4), 2430-2440 (2008).
