Drosophile larvaire JNM immunohistochimie

Summary

Ce protocole montre comment effectuer la larve de drosophile immunohistochimie sur disséqués.

Protocol

Avant de commencer

1. Préparer les solutions suivantes: PBT (0,1% de Triton X100 dans du PBS 1X), PBTB (0,2% de BSA dans PBT), et PBTN (END 2% en PBTB).
2. Disséquer larves de drosophile. S'il vous plaît voir la Drosophile larvaire JNM dissection.

L'immunohistochimie

1. Déplacer les larves d'un tube de 1,5 ml contenant PBT. Laver les larves à deux reprises pendant 15 minutes dans du PBT. Remarque: pour se laver, placez le tube de 1,5 ml sur une table de mixage nutator. Retirer le liquide avec une pippetor et le remplacer avec du liquide frais.
2. Retirez le PBT. Lav....

Discussion

L'immunohistochimie (IHC) est vitale pour l'étude de la biologie JNM, car elle permet la visualisation de la JNM. Ceci est accompli en utilisant des anticorps qui reconnaissent la membrane neuronale (par exemple, HRP), l'presynapse (par exemple, CSP, SYT), et / ou le postsynapse (par exemple, DLG). Molécules de signalisation, des protéines de structure, ou de nouvelles protéines d'intérêt peuvent aussi être colorées. Ensuite, les gènes peuvent être mutés ou missexpressed, et IHC peut détecter une perturb.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Stéréomicroscope “ ; Stemi” ; 2000	Carl Zeiss, Inc.	495101-9804-000
Source lumineuse KL 1500 LCD	Carl Zeiss, Inc.	000000-1063-181
Dumont SS Forceps	Outils de sciences fines	11200-33
Dumont #5 Pinces	Outils de sciences fines	11252-20
Adams™ ; Mélangeur Nutator	BD Biosciences	421105
N°1 Couteau de précision	X-Acto	3201
N° 16 Lames	X-Acto	216
ProLong Gold Réactif Antifade	Invitrogen	36930