माप Caenorhabditis एलिगेंस ठोस मीडिया पर लाइफ स्पैन
Summary
इस अनुच्छेद में हम यूवी मारे बैक्टीरिया भोजन के साथ ठोस मीडिया पर बनाए रखा नेमाटोड के जीवन अवधि को मापने के लिए एक सामान्य प्रोटोकॉल उपस्थित थे.
Abstract
उम्र बढ़ने के एक अपक्षयी प्रक्रिया सेलुलर घटकों और मृत्यु दर में जिसके परिणामस्वरूप organelles के एक प्रगतिशील गिरावट के द्वारा विशेषता है. निमेटोड<em> Caenorhabditis एलिगेंस</em> एक प्रमुख मॉडल के रूप में उम्र बढ़ने के जीव विज्ञान का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया में उभरा है. क्योंकि लगभग हर जैविक उपतंत्र बढ़ती उम्र के साथ कार्यात्मक गिरावट आए, जीवन अवधि ब्याज की प्राथमिक endpoint है जब उम्र बढ़ने की कुल दर पर विचार. नेमाटोड में, जीवन अवधि आमतौर पर दिनों की संख्या एक जानवर बाह्य stimuli करने के लिए उत्तरदायी रहता है के रूप में परिभाषित किया गया है. नेमाटोड तरल मीडिया में या प्लेटों में ठोस मीडिया पर भी प्रचारित कर सकते हैं, और तकनीक दोनों स्थितियों के तहत जीवन अवधि को मापने के लिए विकसित किया गया है. यहाँ हम ठोस निमेटोड वृद्धि मीडिया पर बनाए रखा नेमाटोड के जीवन अवधि को मापने के लिए एक सामान्यीकृत प्रोटोकॉल मौजूद है और यूवी मारे बैक्टीरिया के एक आहार खिलाया. इन प्रक्रियाओं को आसानी से विभिन्न शर्तों के तहत आम परख जीवन काल कर सकते हैं अनुकूलित एक जीवित बैक्टीरिया, आहार प्रतिबंध, और शाही सेना हस्तक्षेप से मिलकर आहार सहित हो.
Protocol
Discussion
दीर्घायु के आनुवंशिक नियंत्रण सी. में बड़े पैमाने पर अध्ययन किया गया है एलिगेंस, मोटे तौर पर आसानी और तेज़ी के साथ जो जीवन काल निर्धारित किया जा सकता की वजह से. इस लेख में चर्चा प्रोटोकॉल सी. मे…
Acknowledgements
यह काम जरा विज्ञान पुरस्कार और NIH MKGS 1R01AG031108-01 एनआईएच प्रशिक्षण P30AG013280 अनुदान द्वारा समर्थित है अनुदान में / ग्लेन दूर सफलताओं के द्वारा समर्थित किया गया था. एम के एक एलिसन एजिंग में मेडिकल फाउंडेशन नई विद्वान है.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Agar | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0145-17-0 (214530) | |
| Ampicillin | Reagent | MidSci | 0339 | |
| BactoTryptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0123-17-3 (211705) | |
| BactoPeptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0118-17-0 (211677) | |
| CaCl2 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9699248 (1332-01) | |
| Carbenicillin | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | C0109 | |
| Cholesterol | Reagent | Sigma-Aldrich | C75209 | |
| Fluorodeoxyuridine (FUDR) | Reagent | Sigma-Aldrich | F0503 | |
| Isopropyl β-d-Thiogalactopyranoside (IPTG) | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | I2481C5 | |
| KPi Dibasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087862 (3252-01) | |
| KPi Monobasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087861 (3246-01) | |
| MgSO4 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9561800 (2500-01) | |
| NaCl | Reagent | Fisher Scientific | S251 | |
| Tris | Reagent | Sigma-Aldrich | T1503 | |
| Yeast Extract | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0886-17-0 (288620) |
References
- Wood, W. B., Wood, W. B. . The Nematode Caenorhabditis elegans. , 1-16 (1988).
- Sutphin, G. L., Kaeberlein, M. Dietary restriction by bacterial deprivation increases life span in wild-derived nematodes. Exp Gerontol. 43, 130-135 (2008).
- Garigan, D. Genetic analysis of tissue aging in Caenorhabditis elegans: a role for heat-shock factor and bacterial proliferation. Génétique. 161, 1101-1112 (2002).
- Chen, D., Pan, K. Z., Palter, J. E., Kapahi, P. Longevity determined by developmental arrest genes in Caenorhabditis elegans. Aging Cell. 6, 525-523 (2007).
- Curran, S. P., Ruvkun, G. Lifespan regulation by evolutionarily conserved genes essential for viability. PLoS Genet. 3, e56-e56 (2007).
- Dillin, A. Rates of behavior and aging specified by mitochondrial function during development. Science. 298, 2398-2401 (2002).
- Hamilton, B. A systematic RNAi screen for longevity genes in C. elegans. Genes Dev. 19, 1544-1555 (2005).
- Hansen, M., Hsu, A. L., Dillin, A., Kenyon, C. New genes tied to endocrine, metabolic, and dietary regulation of lifespan from a Caenorhabditis elegans genomic RNAi screen. PLoS Genet. 1, 119-128 (2005).
- Lee, S. S. A systematic RNAi screen identifies a critical role for mitochondria in C. elegans longevity. Nat Genet. 33, 40-48 (2003).
- Smith, E. D. Age- and calorie-independent life span extension from dietary restriction by bacterial deprivation in Caenorhabditis elegans. BMC Dev Biol. 8, 49-49 (2008).
- Hodgkin, J., Horvitz, H. R., Brenner, S. Nondisjunction Mutants of the Nematode CAENORHABDITIS ELEGANS. Génétique. 91, 67-94 (1979).
- Emmons, S. W., Sternberg, P. W., Riddle, D. L., Blumenthal, T., Meyer, B. J., Priess, J. R. . C. ELEGANS II. , (1997).
- Lipton, J., Kleemann, G., Ghosh, R., Lints, R., Emmons, S. W. Mate searching in Caenorhabditis elegans: a genetic model for sex drive in a simple invertebrate. J Neurosci. 24, 7427-7434 (2004).
- Davis, B. O., Anderson, G. L., Dusenbery, D. B. Total luminescence spectroscopy of fluorescence changes during aging in Caenorhabditis elegans. Biochimie. 21, 4089-4095 (1982).
- Klass, M. R. Aging in the nematode Caenorhabditis elegans: major biological and environmental factors influencing life span. Mech Ageing Dev. 6, 413-429 (1977).
- Steinkraus, K. A. Dietary restriction suppresses proteotoxicity and enhances longevity by an hsf-1-dependent mechanism in Caenorhabditis elegans. Aging Cell. 7, 394-404 (2008).
