Medición Caenorhabditis elegans Duración de la vida en el medio sólido
Summary
En este artículo se presenta un protocolo general para medir la duración de la vida de los nematodos mantienen en medios sólidos con UV-muertos alimentaria bacteriana.
Abstract
El envejecimiento es un proceso degenerativo caracterizado por un deterioro progresivo de los componentes celulares y orgánulos que resulta en la mortalidad. El nematodo<em> Caenorhabditis elegans</em> Se ha convertido en un modelo principal utilizado para estudiar la biología del envejecimiento. Debido a que prácticamente todos los subsistemas biológico sufre deterioro funcional que aumenta la edad, duración de la vida es el objetivo primario de interés cuando se considera la tasa total de envejecimiento. En los nematodos, esperanza de vida se define normalmente como el número de días que un animal sigue siendo sensible a los estímulos externos. Los nematodos pueden propagarse, ya sea en medios líquidos o en el medio sólido en placas, y se han desarrollado técnicas para medir la duración de la vida en ambas condiciones. Aquí se presenta un protocolo generalizado para medir la duración de la vida de los nematodos mantienen en medios sólidos nematodo crecimiento y alimentados con una dieta de muertos UV-bacterias. Estos procedimientos se pueden adaptar fácilmente para abarcar ensayo de la vida bajo diversas condiciones comunes, incluyendo una dieta a base de bacterias vivas, la restricción dietética, y la interferencia de ARN.
Protocol
Discussion
El control genético de la longevidad se ha estudiado extensamente en C. elegans, en gran parte debido a la facilidad y rapidez con que puede ser tiempo de vida determinado. El protocolo discutido en este artículo se describe un marco básico para la obtención de datos reproducibles esperanza de vida en C. elegans y también se puede aplicar a las especies relatednematode. 2 Al hacer algunos cambios sencillos estos procedimientos pueden ser adaptados para medir duración de la vida bajo un…
Acknowledgements
Este trabajo fue apoyado por una Glenn / AFAR avances en la concesión de Gerontología y Subvenciones del NIH 1R01AG031108-01 a MKGS es apoyado por el NIH formación conceder P30AG013280. MK es una Ellison Medical Foundation de Nueva Académico en el envejecimiento.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Agar | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0145-17-0 (214530) | |
| Ampicillin | Reagent | MidSci | 0339 | |
| BactoTryptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0123-17-3 (211705) | |
| BactoPeptone | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0118-17-0 (211677) | |
| CaCl2 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9699248 (1332-01) | |
| Carbenicillin | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | C0109 | |
| Cholesterol | Reagent | Sigma-Aldrich | C75209 | |
| Fluorodeoxyuridine (FUDR) | Reagent | Sigma-Aldrich | F0503 | |
| Isopropyl β-d-Thiogalactopyranoside (IPTG) | Reagent | Gold BioTechnology (GBT) | I2481C5 | |
| KPi Dibasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087862 (3252-01) | |
| KPi Monobasic | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | 5087861 (3246-01) | |
| MgSO4 | Reagent | Fisher Scientific (JT Baker) | NC9561800 (2500-01) | |
| NaCl | Reagent | Fisher Scientific | S251 | |
| Tris | Reagent | Sigma-Aldrich | T1503 | |
| Yeast Extract | Reagent | Fisher Scientific (BD Diagnostic Systems) | DF0886-17-0 (288620) |
References
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