الجسيمة والجميلة تشريح الأذن الداخلية الظهارة الحسية في اسماك الزرد الكبار ( دانيو rerio)
Summary
ظهارة الأذن الداخلية الحسية من الزرد هو نظام أخلاقي نموذجا جيدا لفهم آليات تجديد خلايا الشعر في الفقاريات الكبار. هذا البروتوكول يوضح تشريح غرامة من ظهائر ، التي نستطيع من خلالها الحصول على عينات الأنسجة لدراسة الأحداث على المستويات التجدد الخلوي والتحت خلوية.
Abstract
ظهائر العصبي الحسي في الأذن الداخلية هي حاسمة بالنسبة لهياكل وظائف السمع والتوازن. لذا ، فمن المهم أن نفهم ملامح الخلوية والجزيئية للظهائر ، والتي تتكون أساسا من نوعين من الخلايا : خلايا الشعر (الهيدروجيني) والخلايا المساندة (SCS). هنا نختار لدراسة ظهائر الأذن الداخلية الحسية في الزرد الكبار ، ليس فقط لأنه يتم حفظها عاليا هياكل الظهارية في جميع الفقاريات التي تمت دراستها ، ولكن أيضا لأن الزرد أخلاقي قادر على التجدد الهيدروجيني ، قدرة أن الثدييات تفقد بعد فترة قصيرة من الولادة. نستخدم الأذن الداخلية من الزرد الكبار ونظام نموذجي لدراسة آليات التجديد HC الداخلية الأذن في الفقاريات الكبار التي يمكن أن تكون مفيدة لعلاج السمع السريرية / العجز في ميزان الإنسان نتيجة لفقدان HC.
نحن هنا لشرح كيفية القيام بتشريح الجسيمة وغرامة قدرها ظهائر الأذن الداخلية الحسية في الزرد الكبار. تشريح الإجمالي إزالة الأنسجة المحيطة الأذن الداخلية ومفيد لإعداد أقسام الأنسجة ، والذي يتيح لنا أن دراسة هيكل تفصيلي للظهائر الحسية. تشريح غرامة ينظف أنسجة غير حسية الظهارية كل ظهارة الفردية وتمكننا من دراسة التباين في ظهارة كله بسهولة في كل جبل عينات بشرية.
Protocol
Discussion
في هذا البروتوكول ، وصفنا تشريح الجسيمة وغرامة من ظهائر الأذن الداخلية الحسية من الزرد الكبار ، والتي تمكننا من تحضير عينات الأنسجة لدراسة الخصائص الخلوية والتحت خلوية من ظهائر الحسية.
من أجل إجراء تشريح ناجحة ، فإن الخطوة الأول…
Acknowledgements
وأيد هذا البحث من قبل برنامج بحوث جماعية للمجلس الوطنى لمعهد بحوث الجينوم البشرية والمعاهد الوطنية للصحة.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| MS222 (Ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate salt) | Reagent | Sigma | A5040 | |
| PBS (Phosphate-buffered Saline, 10X) | Reagent | Mediatech | 46-013-CM | |
| Paraformaldehyde | Reagent | Sigma | P-6148 | |
| Triton X-100 | Reagent | Sigma | T8787 | |
| Alexa Fluor 488 phalloidin | Reagent | Invitrogen | A12379 | |
| VECTASHIELD Hard Set Mounting Medium with DAPI | Reagent | Vector Laboratories | H-1500 | |
| Dissection microscope | Microscope | Nikon | SMZ1000 | |
| Insect pins | Tool | Fine Science Tools | 26000-40 | |
| Scissors | Tool | Roboz | RS-5880 | |
| Tweezers | Tool | Roboz | RS-5045 | |
| Needle blade | Tool | Sharpoint | 78-6810 | |
| Fluorescent microscope | Microscope | Zeiss | Axiovert 200M | |
| Dissection pad | Tool | eNasco | SB07840M | |
| Zebrafish | Animal | various | n/a |
