Summary

गैर मानव प्राइमेट ब्रेन में निष्पक्ष Stereology: ज्ञान क्या गिनता है

Published: May 14, 2009
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Summary

रहनुमा मस्तिष्क के संरचनात्मक संगठन को मनुष्यों में सामान्य और रोग की स्थिति में महत्वपूर्ण अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकते हैं. निष्पक्ष stereology सही और कुशलता से किसी दिए गए संदर्भ अंतरिक्ष में कुल न्यूरॉन संख्या (या अन्य कोशिका प्रकार) का आकलन करने के लिए एक विधि है<sup> 1</sup>.

Abstract

गैर मानव प्राइमेट मानव मस्तिष्क की सामान्य कार्य और रोग प्रक्रियाओं को समझने के लिए एक महत्वपूर्ण translational प्रजातियों है. निष्पक्ष stereology, ऊतक वर्गों में जैविक वस्तुओं की मात्रा का ठहराव के लिए राज्य के-the-कला के रूप में स्वीकार किए जाते हैं विधि<sup2></sup> स्तनधारी मस्तिष्क में जैविक सुविधाओं के लिए विश्वसनीय संरचनात्मक डेटा उत्पन्न<sup> 3</sup>. दृष्टिकोण के प्रमुख घटकों में निष्पक्ष हैं (व्यवस्थित यादृच्छिक) anatomically परिभाषित संरचनाओं (संदर्भ रिक्त स्थान), कक्ष संख्या और आकार, फाइबर, और केशिका लंबाई, सतह क्षेत्र, क्षेत्रीय संस्करणों और जैविक वस्तुओं के स्थानिक वितरण के भीतर मात्रा का ठहराव के साथ संयुक्त के नमूने संदर्भ अंतरिक्ष<sup> 4</sup>. पिछले तरीकों पर इन stereological दृष्टिकोण के फायदे के अलावा व्यवस्थित (गैर यादृच्छिक) दोषपूर्ण मान्यताओं और गैर निरीक्षण मॉडल से उत्पन्न होने वाली त्रुटि के सभी ज्ञात स्रोतों के परिहार है. इस अध्ययन कम्प्यूटरीकृत stereology की एक जैविक आवेदन vervet बंदर मस्तिष्क के ललाट प्रांतस्था में कुल neuronal आबादी का अनुमान दस्तावेजों (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>), दो व्यावसायिक रूप से उपलब्ध stereology कार्यक्रमों, BioQuant लाइफ साइंसेज और Stereologer (चित्रा 1) से सहायता के साथ. इसके विपरीत है और दोनों BioQuant से परिणामों की तुलना और के अलावा<em> Stereologer</emसिस्टम>, इस अध्ययन के लिए एक विस्तृत प्रोटोकॉल प्रदान करता है<em> Stereologer</em> सिस्टम.

Protocol

भाग 1: पूर्व ऊतक के प्रसंस्करण बर्क एट अल अनुसार किया जाना चाहिए. (2009) 5. संक्षेप में, ऊतक में अच्छी तरह से paraformaldehyde, glutaraldehyde, या formalin के साथ perfused होना चाहिए. यह मानक transcardial आमतौर पर अन्य अंगों की फसल के लिए इस्ते?…

Discussion

एक रहनुमा मस्तिष्क में निष्पक्ष stereology अन्य जैविक नमूनों के समान है. हालांकि, रहनुमा मस्तिष्क के आकार को देखते हुए, एक सावधान प्रसंस्करण की योजना के बाद से vervet बंदर की एक एकल गोलार्द्ध में 1200 से अधिक वर्गों ?…

Acknowledgements

लेखकों Ikiel Ptito अपने निरंतर तकनीकी सहायता के लिए धन्यवाद देना चाहूंगा. NSERC सांसद के लिए अनुदान.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
Stereologer   Stereology Resource Center (Chester, MD) www.disector.com  
Stereology Tool-Kit Stereologer system   BioQuant Life Sciences (Nashville, TN)    
StereoInvestigator   MicroBright Field (Willston, VT)    

References

  1. West, M., Slomianka, L., Gundersen, H. Unbiased stereological estimation of the total number of neurons in the subdivisions of the rat hippocampus using the optical fractionator. Aat Rec. 231, 482-497 (1991).
  2. Saper, C. B. Any way you cut it: a new journal policy for the use of unbiased counting methods. J Comp Neurol. 364, 5-5 (1996).
  3. Sterio, D. C. The unbiased estimation of number and sizes of arbitrary particles using the disector. J Microsc. 134, 127-136 (1984).
  4. Mouton, P. R. . Principles and Practices of Unbiased Stereology. , (2002).
  5. Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Dissecting the non-human primate brain in stereotaxic space. J Vis Exp. 29, (2009).
  6. Burke, M. W., Zangenehpour, S., Boire, D., Ptito, M. Brain banking: Making the most of your research. J Vis Exp. 29, (2009).
  7. Manaye, K. F., Wang, P., O’Neil, J., Huafu, S., Tizabi, Y., Thompson, N., Ottinger, M. A., Ingram, D. K., Mouton, P. R. Neuropathological Quantification Of Dtg APP/PS1: Neuroimaging, Stereology, And Biochemistry. AGE. 29, 87-96 (2009).
  8. Burke, M. W., Palmour, R. M., Ervin, F. R., Ptito, M. Neuronal reduction in frontal cortex of primates after prenatal alcohol exposure. Neuroreport. 20, 13-17 (2009).
  9. Zangenehpour, S., Burke, M. W., Chaudhuri, A., Ptito, M. Batch immunostaining for large-scale protein detection in the whole monkey brain. J Vis Exp. 29, (2009).
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Citer Cet Article
Burke, M., Zangenehpour, S., Mouton, P. R., Ptito, M. Knowing What Counts: Unbiased Stereology in the Non-human Primate Brain. J. Vis. Exp. (27), e1262, doi:10.3791/1262 (2009).

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