Zu wissen, was zählt: Unbiased Stereology in der nicht-menschlichen Primaten Gehirn
Summary
Die anatomische Organisation des Primas Gehirn kann wichtige Einblicke in normalen und pathologischen Bedingungen beim Menschen liefern. Unvoreingenommene Stereologie ist eine Methode zur genauen und effizienten Schätzung der insgesamt Neuron-Nummer (oder anderen Zelltyp) in einem bestimmten Bezugsraum<sup> 1</sup>.
Abstract
Die nicht-menschlichen Primaten ist ein wichtiger translationale Arten für das Verständnis der normalen Funktion und Krankheit Prozesse des menschlichen Gehirns. Unvoreingenommene Stereologie, die Methode als state-of-the-art für die Quantifizierung von biologischen Objekten in Gewebeschnitten akzeptiert<sup> 2</sup> Erzeugt zuverlässige Strukturdaten für biologische Funktionen im Gehirn von Säugetieren<sup> 3</sup>. Die wichtigsten Komponenten des Ansatzes sind unvoreingenommene (systematisch-Random) Probenahme von anatomisch definierten Strukturen (Referenz Leerzeichen) Quantifizierung der Zellzahl und Größe, Faser-und Kapillar-Längen, Flächen, Volumen und regionalen räumlichen Verteilungen von biologischen Objekten innerhalb der kombinierten Referenzraum<sup> 4</sup>. Zu den Vorteilen dieser stereologische Ansätze im Vergleich zu früheren Methoden ist die Vermeidung aller bekannten Quellen von systematischen (nicht-zufällige) Fehler, die sich aus falschen Annahmen und nicht überprüfbare Modelle. Diese Studie dokumentiert eine biologische Anwendung von computergestützten Stereologie zur gesamten neuronalen Population im frontalen Kortex der grünen Meerkatze Gehirn Schätzung (<em> Chlorocebus aethiops sabeus</em>) Mit Hilfe von zwei kommerziell erhältlichen Stereologie Programme, BioQuant Life Sciences und Stereologer (Abbildung 1). Darüber hinaus, um den Kontrast und Vergleich der Ergebnisse aus beiden BioQuant und<em> Stereologer</em> Systeme, liefert diese Studie ein detailliertes Protokoll für die<em> Stereologer</em> System.
Protocol
Discussion
Unvoreingenommene Stereologie in einem Primaten Gehirn ist ähnlich wie bei anderen biologischen Proben. Doch angesichts der Größe des Primatengehirn, ist eine sorgfältige Verarbeitung Plan empfohlen, da eine einzelne Hemisphäre des grünen Meerkatze liefert mehr als 1200 Teile, wenn sie bei 50 um in Scheiben geschnitten. Zunächst empfehlen wir stereotaxically blockiert das Gehirn in 1 cm-Blöcke, die eine Standard-Schnittfläche zwischen den Blöcken und Themen bietet, minimiert Teilstrecken zwischen den Blöcken …
Acknowledgements
Die Autoren bedanken sich bei Ikiel Ptito für seine weitere fachliche Unterstützung danken. NSERC Zuschuss zu MP.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Stereologer | Stereology Resource Center (Chester, MD) | www.disector.com | ||
| Stereology Tool-Kit Stereologer system | BioQuant Life Sciences (Nashville, TN) | |||
| StereoInvestigator | MicroBright Field (Willston, VT) |
References
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