Мышь эпителиальных клеток молочной форме Mammospheres Во лактогенный Дифференциация
Summary
HC11 лактогенный дифференциации можно охарактеризовать образование куполообразных сооружений, которые упоминаются как mammospheres. Структуры могут быть перечислены по фазе микроскопии отличие от помощи в количественном лактогенный дифференциации.
Abstract
Фенотипические мера обычно используется для определения степени дифференциации в лактогенный молочной железы мыши эпителиальных клеточных культур является формирование куполообразной формы клеточных структур называют mammospheres<sup> 1</sup>. HC11 клеточная линия была использована в качестве модельной системы для изучения регуляции молочных лактогенный дифференциация как<em> В пробирке</em> И<em> В естественных условиях</em<sup> 2</sup>. HC11 клетки дифференцируются и синтезируют белки молока в ответ на обращение с лактогенный гормонов. Вслед за ростом HC11 молочной железы мыши эпителиальных клеток к слиянию, лактогенный дифференциации было вызвано добавлением сочетание лактогенный гормонов, включая дексаметазон, инсулин и пролактина, называют DIP. HC11 клетки вызвать их дифференцировку были сфотографированы порой до 120 часов после индукции дифференцировки и число mammospheres, которые появились в каждой культуре был причислен. Размеров отдельных mammospheres коррелирует со степенью дифференциации и это изображается в образах дифференциации клеток.
Protocol
Discussion
Для того, чтобы эту технику, чтобы быть успешным и самого лучшего качества, эпителиальные клетки должна поддерживаться на уровне слияния до того, как индуцированные лактогенный гормонов. Там могут быть ситуации, когда Есть множество mammospheres, что делает количественного трудно. Таким обр?…
Acknowledgements
Средства от Конгрессом Режиссер медицинских исследований Фонда грант (DAMD17-01-0264) к М. Л. Катлер и Соединенными Штатами военного института рака в ML Катлер поддерживается работа.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| RPMI | Invitrogen | 21870076 | ||
| Fetal Bovine Serum | Atlanta Biologicals | S11550 | ||
| L-Glutamine | Gibco | 25030 | ||
| PenStrep | Gibco | 15140 | ||
| Hepes | Quality Biologicals | 118089060 | ||
| EGF | Sigma | E9644 | ||
| Insulin | Gibco | 12585-014 | ||
| Dexamethasone | Sigma | D1756 | ||
| Microscope | Olympus | IX71 | ||
| Digital Camera | QImaging | Retiga 2000RV Fast 1394 |
References
- Blatchford, D. R., Hendry, K. A., Turner, M. D., Burgoyne, R. D., Wilde, C. J. Vectorial secretion by constitutive and regulated secretory pathways in mammary epithelial cells. Epithelial Cell Biol. 4, 8-16 (1995).
- Wang, W. Glucocorticoid induced expression of connective tissue growth factor contributes to lactogenic differentiation of mouse mammary epithelial cells. J Cell Physiol. 214, 38-46 (2008).
