엘라스타제와 Murine 실험 복부 대동맥 동맥류의 생성
Summary
이 동영상은 복부 대동맥의 infrarenal 세그먼트에 돼지의 췌장의 엘라스타제의 과도 intraluminal 주입을 통해 생쥐의 복부 대동맥 동맥류 (AAA)을 유도하는 방법을 보여줍니다. 모델은 다수의 유전자 변형과 유전자 녹아웃 마우스의 출현으로 인해 AAA의 pathobiology에 광범위한 통찰력을 추가할 수 있습니다.
Abstract
복부 대동맥의 infrarenal 세그먼트에 돼지의의 췌장 엘라스타제의 과도 intraluminal 주입은 처음 Anidjar 및 동료에 의해 쥐에서 설명한 이래 복부 대동맥 동맥류 (AAA)의 가장 널리 사용되는 동물 모델이다. 개발 1 근거 기반되었습니다 엘라스틴의 중단 성격에 AAAs에서 관찰했다. 이 쥐 모델은 마우스의 infrarenal 대동맥 지역에 AAAs을 생산하도록 수정되었습니다. 2 모델은 많은 유전자 변형과 유전자 녹아웃 마우스의 출현으로 인해 AAA의 pathobiology에 광범위한 통찰력을 추가할 수 있습니다. 또한, 그것은 AAA를위한 잠재적인 치료 대리인을 테스트하기 위해 가능한 플랫폼입니다. 이 비디오에서는, 우리는 실험실에서 사용되는 엘라스타제 주입 AAA 절차를 보여줍니다.
마우스는 isoflurane 2.5 %를 사용하여 anesthetized하고 있으며, 개복술은 멸균 조건하에 수행됩니다. 복부 aortais은 운영 stereomicroscope (Leica)의 도움을 고립. 근위 및 말초 대동맥 주위 임시 ligatures를 삽입 후, aortotomy는 30 게이지 바늘의 끝에있는 분기점에서 생성됩니다. PE – 10 폴리에틸렌 튜브의 열 테이퍼 세그먼트는 aortotomy를 통해 소개하고 안전합니다. 대동맥 루멘은 이후 생리가 포함된 형식의 I 돼지의 췌장 엘라스타제 (; 시그마 화학 (주) 4.5 U / ML)와 100mm의 HG에서 5~15분에 대한 perfused입니다. 재관류의 카테터 제거 후 aortotomy는 루멘의 수축하지 않고 수리합니다.
Protocol
Discussion
이전 연구는 다른 상업 엘라스타제 준비 3 AAA 개발에 중요한 많은 – 투 – 많은 변화를 언급했습니다. 그러므로, 그것은 생산을 많이 모니터뿐만 아니라 AAAs를 유도하기 위해 준비의 능력을 문서화하기 위해 적절한 제어 그룹을 가지고 중요합니다.
흥미롭게도,이 모델에서 AAA 개발에 자화율 3를 사용하여 마우스 변형에 따라 좌우됩니다. 현재 비디오에 사용되?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
국립 보건원에서 (P50 HL083800 – 03) :이 작품은 SCCOR 부여 "메커니즘, 충화, 그리고 치료 AAA 질병"을 지원했습니다
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Type I porcine pancreatic elastase | Reagent | Sigma | E1250 | |
| polyethylene tubing (PE-10) | CLAY ADAMS | 427400 | ||
| CHANGE-A-TIP | Bovie | 18010-00 (FST) | cautery knife | |
| LEICA MZ6 | Leica | stereomicroscope | ||
| LEICA DFC290HD | Leica | USB camera | ||
| Image Pro Express ver. 6.0 | Media Cybernetics | software |
References
- Anidjar, S., Salzmann, J. L., Gentric, D. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82 (3), 973-973 (1990).
- Pyo, R., Lee, J. K., Shipley, J. M. Targeted gene disruption of matrix metalloproteinase-9 (gelatinase B) suppresses development of experimental abdominal aortic aneurysms. J Clin Invest. 105 (11), 1641-1641 (2000).
- Carsten, C. G., Calton, W. C., Johanning, J. M. Elastase is not sufficient to induce experimental abdominal aortic aneurysms. J Vasc Surg. 33 (6), 1255-1255 (2001).
