प्रोटीन ubiquitination की जांच
Summary
Ubiquitination एक महत्वपूर्ण posttranslational तीन एंजाइमों के एक सेट से बाहर किए गए संशोधन है. इस संशोधन में शामिल जीनों के उत्परिवर्तन के कई अलग अलग मानव रोगों के साथ जुड़े रहे हैं. यहाँ, हम प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए संवर्धित कोशिकाओं में प्रोटीन ubiquitination का पता लगाने<em> Vivo में</em> और परीक्षण नलियों<em> इन विट्रो में</em>.
Abstract
Ubiquitination, पॉलीपेप्टाइड के लिए प्रोटीन लक्ष्य ubiquitin सहसंयोजक लगाव, एक प्रमुख posttranslational तीन एंजाइमों के एक सेट से बाहर किए गए संशोधन है. वे ubiquitin को सक्रिय एंजाइम E1, ubiquitin conjugating एंजाइम E2, और ubiquitin ligase E3 शामिल हैं. E1 और E2, E3 ubiquitin ligases प्रदर्शन सब्सट्रेट विशिष्टता के लिए विपरीत. दूसरी ओर, कई एंजाइमों deubiquitylating polyubiquitinated प्रोटीन प्रसंस्करण में भूमिका है. Ubiquitination प्रोटीन स्थिरता, सेलुलर स्थानीयकरण और जैविक गतिविधि के परिवर्तन में परिणाम कर सकते हैं. मार्ग / ubiquitination deubiquitination या बदल ubiquitin प्रणाली समारोह में शामिल जीनों के उत्परिवर्तन कैंसर, neurodegeneration, और चयापचय विकारों के विभिन्न प्रकार के जैसे कई अलग अलग मानव रोगों के साथ जुड़े रहे हैं. लक्ष्य प्रोटीन की बदल या सामान्य ubiquitination का पता लगाने के इन रोगों के रोगजनन पर एक बेहतर समझ प्रदान कर सकता है. यहाँ, हम प्रोटोकॉल का वर्णन करने के लिए संवर्धित कोशिकाओं में प्रोटीन ubiquitination का पता लगाने<em> Vivo में</em> और परीक्षण नलियों<em> इन विट्रो में</em>. ये प्रोटोकॉल भी अन्य ubiquitin की तरह छोटे अणु sumolyation और neddylation के रूप में इस तरह के संशोधन का पता लगाने में उपयोगी है.
Protocol
Discussion
इस प्रस्तुति में, हम पहली बार कदम है कि पता लगाने की अनुमति सुसंस्कृत स्तनधारी कोशिकाओं में ब्याज की एक प्रोटीन पर ubiquitin संशोधन का वर्णन किया. आदेश में ubiquitination का पता लगाने के लिए ब्याज की प्रोटीन पर गैर covalently…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
पुनर्योजी चिकित्सा RS1 – +००,३३१ 1 अनुदान के लिए कैलिफोर्निया इंस्टीट्यूट और RL1-००६८२ 1 (जेड जांग), अमेरिकी पार्किंसंस यह काम एनआईएच DC006497 RO1 अनुदान, NS057289 RO1, और ES016738 PO1 (जेड जांग) द्वारा समर्थित किया गया रोग एसोसिएशन (जेड जांग और वाईएस चू), और माइकल जे फॉक्स फाउंडेशन पार्किंसंस अनुसंधान के लिए (जेड जांग).
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