Periferik Sinir Aşılama ve Matrix Modülasyon birleştiren Yaralı Rat Spinal Kord Onarım
Summary
Spinal kord travması sonucu beyin ile iletişimi bozar. Kayıp bağlantısı geri yüklemek için uzun mesafe büyümeyi teşvik etmek için inhibitör molekülleri kaldırmak için nörotrofik faktörler ve matris-modüle enzimler ile kombinasyon halinde rejenere lifler için altyapısını sağlamak üzere bir periferik sinir grefti kullanmaktadır.
Abstract
Spinal kord (SCI) travmatik yaralanma nöronların ölümü, motor ve duyusal sinir lifi (akson) yolları ve beyin ile iletişimi kesintiye uğraması bozulmasına neden olur. Araştırmamızın amaçlarından biri lezyon sitesi üzerinden bağlantı geri akson rejenerasyonu teşvik etmektir. Bunu başarmak için, periferik sinir segmentleri siyatik sinir ya da omurilik hasarlı uçları arasında doğrudan yerleştirilir veya lezyon çapında bir köprü oluşturmak için kullanılır tekniği greft (PN) geliştirdi. Diğer nöral dokuların nakli ile karşılaştırıldığında bu yaklaşım birçok avantaj vardır; rejenere aksonları belirli bir hedef alanına doğru yönlendirilebilir, rejenere akson sayısı ve kaynak kolayca izleme teknikleri tarafından belirlenir, greft ölçmek için elektrofizyolojik deneyleri için kullanılan olabilir greft aksonlar fonksiyonel iyileşme ile ilişkili olduğunu ve bir otolog sinir greft reddi olasılığını azaltmak için kullanmak mümkündür. Laboratuarımızda biz karşılaştırılabilir sonuçlar hem otolog (verici ve alıcı aynı hayvan) ve heterolog (bağışçı ve alıcı farklı hayvanların) greftler gerçekleştirdik. Bu yaklaşım, akut hem de kronik yaralanma durumlarında başarıyla kullanılmaktadır. PN greft distal sonuna ulaşmak rejenere aksonları genellikle omuriliğe geri genişletmek için başarısız, bu yüzden chondroitinase, SCI alanı çevreleyen bağ dokusu ile ilişkili inhibitör molekülleri düşmeye microinjections kullanabilirsiniz. Aynı zamanda ekzojen büyüme ve trofik molekülleri sağlayan omurilik içine uzun mesafe aksonal regrowth teşvik bulduk. Birkaç ay transplantasyonu sonrası, spinal kord yaralı hayvanlar kurtarma fonksiyonu değerlendirmek için, anatomik, davranışsal ve elektrofizyolojik testler çeşitli gerçekleştirin. Bu deneysel bir yaklaşım yaralanma farklı düzeylerde ve farklı türlerde (fare, sıçan ve kedi), birkaç spinal kord yaralanması modelleri başarılı bir şekilde kullanılır olmuştur. Önemlisi, periferik sinir grefti yaklaşım, akut ve kronik yaralı nöronlar tarafından rejenerasyonu teşvik etkilidir.
Protocol
Discussion
- Deney tekrarlanabilirlik için spinal kord yaralanması, hayvandan hayvana tutarlı olması çok önemlidir. Bu nedenle laminektomi için uygun vertebra süreç tespit edilmesi önemlidir. Biz bu çalışma için bir hemisection veya transeksiyonu lezyon modeli kullanarak Çünkü lezyonun boyutu hakkında veya belirli omurilik yollarında yaralı veya yokolma olmadığını belirsizlik yoktur.
- Periferik sinir akson büyümesinin destekleyen birkaç nörotrofik faktörler üretmek için, çünkü periferik aksonları bu başl…
Acknowledgements
Bu çalışma NIH / NINDS Hibeler NS26380 ve NS55976, Christopher ve Dana Reeve Vakfı ve Daniel Heumann Omurilik Araştırma Fonu tarafından desteklenmiştir. Drexel University College Tıp Omurilik Araştırma Merkezi, bu işi tamamlamak için kullanılan çekirdek tesisleri için destek sağlar.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 10-0 silk suture | ArosSurgical | T5A10N10 | ||
| 6-0 silk suture | McKesson | 2693 | ||
| Ampicillin | McKesson | 483549 | ||
| Antibody to cFos | Sigma-Aldrich | F7799 | ||
| Biotinylated dextran Amine | Invitrogen | D7135 | ||
| Buprenorphin (.3mg/ml) | McKesson | 12496075701 | ||
| Chondroitinase ABC | Associates of Cape Cod | 100332-1A | ||
| Euthasol | Webster Veterinary | 07-805-9296 | ||
| Hanks Balanced Salt Solution | Cellgro | 21-021-CV | ||
| Isoflurane | Henry Schein | 209-1966 | ||
| Michel Wound Clips | Fine Science Tools | 12040-02 | ||
| Neurotrace Kit | Invitrogen | N7167 | ||
| True Blue | Sigma-Aldrich | T5891 | ||
| Xenodine | Webster Veterinary | 92201 | ||
| Hot Bead Sterilizer | Fine Science Tools | |||
| Forced Exercise Wheel | Lafayette Instruments | |||
| TreadScan System | Clever System | |||
| Infinite Horizon Impact Device | Precision Systems and Instrumentation | |||
| Magnetic Stimulation Device | MagStim Inc. |
References
- Houle, J. D. Demonstration of the potential for chronically injured neurons to regenerate axons into intraspinal peripheral nerve grafts. Exp. Neurol. 113, 1-9 (1991).
- Ye, J. H., Houle, J. D. Treatment of the chronically injured spinal cord with neurotrophic factors can promote axonal regeneration from supraspinal neurons. Exp. Neurol. 143, 70-81 (1997).
- Houle, J. D., Tom, V., Mayes, D., Wagoner, G., Phillips, N., Silver, J. Combining an autologous peripheral nerve bridge and matrix modification by chondroitinase allows robust functional regeneration across a hemisection lesion of the adult rat spinal cord. J. Neurosci. 26, 7405-7415 (2006).
- Tom, V., Houle, J. D. Intraspinal microinjection of chondroitinase ABC following injury promotes axonal regeneration out of a peripheral nerve graft. Exp. Neurol. 211, 315-319 (2008).
