一个多室中枢神经系统的神经胶质细胞共培养的微流体平台
Summary
我们开发了一种新型的多舱的神经元共培养的微平台，在体外培养的中枢神经系统的轴突神经胶质细胞相互作用的研究。该平台能够进行多达6个独立并行实验，并采用新开发的宏观/微观混合制备方法。
Abstract
我们目前在体外中枢神经系统轴突的神经胶质细胞相互作用的研究一种新型的神经元多室共培养微平台，能够进行高通量平行的6个独立的实验。我们开发了一种新的制造方法，以建立具有微观和宏观尺度的结构，通过一个单一的软光刻工艺相同设备内的微流体装置，使大规模制造，具有良好的重复性。
多室微合作文化的平台是一个神经元轴突/神经胶质细胞和少突胶质细胞（OLS）6车厢SOMA车厢组成。 SOMA舱和轴突/神经胶质细胞车厢连接阵列轴突指导微函数作为物理屏障只在SOMA车厢中的神经元胞体，同时允许轴突轴突/神经胶质细胞车厢长成。装入轴突/神经胶质细胞车厢的OLS可以交互只与但不与神经元的胞体或树突的轴突，使局部轴突的神经胶质细胞相互作用的研究。微也使车厢之间的流体隔离，允许6个独立的实验，以一个单一的设备上进行更高的吞吐量。
使用聚二甲基硅氧烷（PDMS）的软光刻技术在生物医学常用的微型器件。在这些设备上的水库，通常定义的手动冲床。虽然简单，穷人的路线和时间费时的过程，使得这个过程中不适合时，大量的水库已被反复创建。新开发的方法并不需要手动冲压水库，克服这些局限性。首先，7个水库（深：3.5毫米），上一聚（甲基丙烯酸甲酯）（PMMA）使用的微型铣床块。然后，脊微观结构的阵列，在玻璃基板上制造，对有机玻璃块定义胞体和轴突/神经胶质细胞车厢连接的微热压印。这个过程导致了宏观尺度的水库（3.5毫米）和微观尺度通道（2.5微米），在一个单一的聚甲基丙烯酸甲酯主不谋而合。一个PDMS的副本作为一个模具师傅用软光刻技术和最终的PDMS设备是从这个主复制。
E16 – 18只大鼠的初级神经元被装到SOMA室和培养两个星期。细胞培养一周后，轴突越过微，形成轴突轴突/神经胶质细胞车厢内唯一的网络层。整个六轴突/ P1 – 2只大鼠神经胶质细胞车厢和OLS均匀轴突增长在14 天的体外补充轴突/神经胶质细胞车厢的共同培养。
Protocol
Discussion
我们已经开发出一个多车厢文化合作平台，为研究哺乳动物中枢神经系统轴突的神经胶质细胞相互作用。中枢神经系统轴突被成功分离，从神经细胞团体/树突和少突胶质细胞内的设备已成功合作培养。神经元密度可以是多种多样的应用程序，但浓度过低或过高，可导致细胞死亡。此外，重要的是改变培养基的只有一半，在基板上，使细胞或轴索层不被损坏。我们预计，该系统将会为研究中枢神经…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
这项工作是支持由美国国立卫生/国立精神卫生研究所（NIH /镍氢电池）研究院授予＃1R21MH085267。
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