Dans cette vidéo, nous vous présentons la sonde microfluidique<sup> 1</sup> (PMF). Nous expliquons en détail comment assembler le MFP, montez au sommet d'un microscope inversé, et l'aligner par rapport à la surface du substrat, et enfin montrer comment l'utiliser pour traiter une surface de substrat immergé dans une solution tampon.
Abstract
Dispositifs microfluidiques permettent des dosages pour être réalisée en utilisant des quantités infimes de l'échantillon et ont récemment été utilisé pour contrôler le microenvironnement des cellules. La microfluidique est souvent associé à microcanaux fermés qui limitent leur utilisation à des échantillons qui peuvent être introduits, et cultivées dans le cas des cellules, dans un volume confiné. D'autre part, micropipetage système ont été utilisées pour perfuser sur place des cellules et des surfaces, notamment en utilisant push-pull configurations où l'on agit pipette comme source et l'autre comme un évier, mais le confinement de l'écoulement est difficile en trois dimensions. Par ailleurs, les pipettes sont fragiles et difficiles à positionner et sont donc utilisés dans une configuration statique seulement.
La microfluidique sonde (MFP) contourne les contraintes imposées par la construction de canaux microfluidiques fermée et au lieu d'enfermer l'échantillon dans le système microfluidique, le flux microfluidique peut être livré directement sur l'échantillon, et numérisés à travers l'échantillon, en utilisant le MFP. . L'injection et orifices d'aspiration sont situés à quelques dizaines de micromètres d'une autre, de sorte qu'un microjet injecté dans l'espace est confiné par les forces hydrodynamiques du liquide environnant et entièrement aspiré dans l'ouverture d'autres. Le microjet peut être rincé à travers la surface du substrat et fournit un outil précis pour le dépôt localisé / livraison de réactifs qui peuvent être utilisées sur de grandes surfaces par balayage de la sonde sur la surface. Dans cette vidéo, nous présentons la microfluidique sonde 1 (MFP). Nous expliquons en détail comment assembler le MFP, montez au sommet d'un microscope inversé, et l'aligner par rapport à la surface du substrat, et enfin montrer comment l'utiliser pour traiter une surface de substrat plongé dans un tampon.
Protocol
1. La microfabrication de la tête de la sonde (procédé non montré dans la vidéo) Une plaquette de silicium 2, quatre pouces de diamètre, 525 um d'épaisseur, avec une couche de SiO2 thermique 1 um d'épaisseur est spincoated avec une résine photosensible (PR) pendant 45 s à 4000 rpm. La plaquette est précuites à 110C pendant 50 s, et exposée à travers un masque comportant tous les éléments (les ports et les microcanaux) pendant 5 s, développé et rincés dans DI. </…
Discussion
La sonde microfluidique (PMF) est polyvalent, car il est (i) mobiles, (ii) adaptable pour une utilisation avec différents types de réactifs et de substrat et il peut (iii) être exploité sur de grandes surfaces.
Bulles indésirables peuvent entraîner des perturbations de la circulation pour éviter les bulles, toutes les composantes doivent être remplis de liquides avant l'assemblage. L'écart entre la sonde et la surface est seulement de quelques micromètres, et pourtant la me…
Acknowledgements
Ce travail a été financé par le Fonds de Recherche sur la Nature et les Technologies de Québec, la Fondation canadienne pour l'innovation et les Instituts canadiens de recherche en santé du Canada (IRSC).
Perrault, C. M., Qasaimeh, M. A., Juncker, D. The Microfluidic Probe: Operation and Use for Localized Surface Processing. J. Vis. Exp. (28), e1418, doi:10.3791/1418 (2009).