Visualisierung des schlagenden Herzens in Drosophila</em
Summary
Technik für die Visualisierung des schlagenden Herzens in Larven und erwachsene erforderlich<em> Drosophila</em> Präsentiert werden. Jede Lebensphase erfordert eine andere Methodik.
Abstract
Die<em> Drosophila</em> Herz hat vor kurzem als ein gutes Modellsystem für die Untersuchung der genetischen, zellulären und molekularen Mechanismen, die Funktion in myogene Herzen entstanden. Ein wichtiger Schritt bei der Untersuchung der Herzfunktion in-the-fly ist, einen Weg in das Herz in einer Weise, dass seine myogene Funktion bewahrt, solange noch die schlagenden Herzen Organ beobachtet und protokolliert werden zugreifen. Zwei verschiedene Methoden zur Beobachtung und Aufzeichnung des schlagenden Herzens in beiden Larven und erwachsenen<em> Drosophila</em> Werden hier beschrieben. Unsere semi-intakten Präparat mit adulten Fliegen ermöglicht die übersichtliche Visualisierung der abdominalen Herz ohne Störung durch die pigmentierte Haut-und darüberliegenden Fettkörper. Zur Aufnahme Larven Herz schlägt, ist es notwendig, die Larve, die Körperwand Bewegungen wodurch Herz Bewegungen, die nicht mit myokardialen Kontraktionen verbunden sind minimiert immobilisieren. Unsere Methoden, stabile Erwachsene und Larven Herzen Zubereitungen, die stundenlang mit Raten von 1-3 Hz schlagen können.
Protocol
Discussion
Die Drosophila-Modell hat sich als ein leistungsfähiges Tool, das genetische verwendet wurde, um eine Vielzahl von wissenschaftlichen Fragestellungen reichen von embryonalen Entwicklung, Lernen und Gedächtnis-Adresse sein. Kürzlich dieses vielseitige Modell-Organismus wurde verwendet, um die Genetik der Herzfunktion in-the-fly zu untersuchen. Eine Reihe von Versuchen, Herz Physiologie bei erwachsenen Drosophila zu quantifizieren sind auf Beobachtungen in intakten fliegt durch die Bauchdecke Nagelhaut, gelten. Die mei…
Acknowledgements
KO wird durch einen Zuschuss von der American Heart Association unterstützt.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Micro Dissecting Spring Scissors (curved) | Roboz | RS-5611 | Good for gross cuts (Step 3) | |
| Micro Dissecting Spring Scissors (straight) | Roboz | RS-5620 | ||
| Dumont #55 forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | ||
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11295-10 | ||
| Glass Capillaries, 100ul | VWR | 53432-921 | ||
| Glass Capillaries, fine | Science Products | GB100T8P | ||
| Pipette Puller | Sutter Equipment | P-97 | Both horizontal and vertical pipette pullers will work | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/16” inner diameter | for 100μl capillaries | |
| Plastic tubing | Tygon R-3603 | 1/32” inner diameter | for small capillaries | |
| Histoacryl® tissue adhesive | B.Braun, Melsungen |
References
- Ocorr, K., Reeves, N., Wessells, R. J., Fink, M., Chen, H. -. S. V., Akasaka, T., Yasuda, S., Metzger, J., Giles, W., Posakony, J. W., Bodmer, R. KCNQ potassium channel mutations cause cardiac arrhythmias in Drosophila that mimic the effects of aging. Proc Natl Acad Sci U S A. 104, 3943-3948 (2007).
- Broadie, K. S., Bate, M. Development of the embryonic neuromuscular synapse of Drosophila melanogaster. J Neurosci. 13, 144-166 (1993).
