ووضعت جزيرة perifusion ميكروفلويديك الجهاز لتقييم افراز الانسولين من الجزر الحيوية متعددة ومضان التصوير المتزامن لتدفق الكالسيوم والتغيرات المحتملة الميتوكوندريا.
Abstract
ووضعت جزيرة perifusion ميكروفلويديك الجهاز لتقييم افراز الانسولين من الجزر الحيوية متعددة ومضان التصوير المتزامن لتدفق الكالسيوم والتغيرات المحتملة الميتوكوندريا. الجهاز يتكون من ثلاث طبقات : الطبقة الأولى تحتوي على مجموعة من الآبار الميكروسكيل (500 و 150 ميكرومتر قطرها ميكرون العمق) التي تساعد على شل الجزر في حين تتعرض لتدفق وزيادة المساحة المكشوفة من الجزر ، والثاني يحتوي على طبقة دائرية perifusion غرفة (3 ملم العميق ، 7 مم) ، وطبقة ثالثة تحتوي على مدخل القناة لخلط أن المشجعين من قبل حقنها في غرفة perifusion (2 ملم في العرض ، 19 ملم في الطول ، و 500 ميكرومتر في الطول) لتحسين كفاءة خلط قبل دخول غرفة perifusion. إنشاء تدرجات مختلفة بما في ذلك الجلوكوز على شكل جرس الخطية ، والأشكال المربعة ويمكن أيضا أن تنشأ في شبكة perifusion ميكروفلويديك وتظاهر هو.
Protocol
ألف التصنيع الدقيق من 3 طبقات الجهاز perifusion ميكروفلويديك حسنا أسفل ماجستير البروتوكول (150 ميكرون الآبار العميقة) تنظيف الرقاقة باستخدام شفرة حلاقة اذا لزم الامر. نظيفة مع الأسيتون و?…
Discussion
النظم التقليدية perifusion جزيرة (macroscale والميكروسكيل) بعض القيود المعقدة بما في ذلك الإعداد والتصميم ، والمتطلبات التقنية العالية ، وصعوبة إنشاء المستخدم التدرجات الكيميائية المنصوص عليها في النظام. نظام perifusion ميكروفلويديك الموصوفة هنا يتغلب على هذه القيود مع هندسة بس?…
Acknowledgements
وأيد هذا العمل من قبل الجمعية الأميركية للجامعيات الزمالة الدولية لAdewola اديولا ، NIH / NCRR (U42RR023245) لخوسيه أوبرهولزر ، ومشروع السكري شيكاغو.
Adewola, A. F., Wang, Y., Harvat, T., Eddington, D. T., Lee, D., Oberholzer, J. A Multi-Parametric Islet Perifusion System within a Microfluidic Perifusion Device. J. Vis. Exp. (35), e1649, doi:10.3791/1649 (2010).