이 절차를 빠르게 쉽게 마우스 배아 섬유아 세포 (MEFs) 또는 기타 기본 세포에 가장 적합한 electroporation 조건을 식별하는 유전자 Pulser MXcell의 electroporation 시스템을 사용하는 방법을 보여줍니다. 문제 해결을위한 고려 사항도 관련 비디오 설명합니다.
그것은 electroporation은 기본 세포에 플라스미드 DNA 또는 siRNA을 소개하는 가장 효과적인 방법임을 더욱 분명 해지고 있습니다. 진 Pulser MXcell의 electroporation 시스템과 진 Pulser의 electroporation 버퍼 (바이오 래드)은 특히 포유 동물 세포를 쉽게와 같은 기본 및 줄기 세포와 같은 어려운 transfect 세포로 핵산을 transfect하기 위해 개발되었습니다. 우리는 신속하게 최고의 electroporation 조건을 식별하는 간단한 실험을 수행하는 방법을 보여줍니다 것입니다. 우리는 실험이 최적화가 수행 동시에 실시 할 수 있도록 electroporation 조건의 범위를 통해 몇 가지 샘플을 실행하는 방법을 보여줍니다 것입니다. 우리는 또한 같은 electroporation 효율을 유지하면서 최적의 조건, 표준 electroporation의 cuvettes와 함께 사용할 수 있습니다 96 – 웰 플레이트 electroporation을 사용하여 electroporation의 cuvettes에 electroporation 플레이트의 스위치를 촉진 식별 방법을 보여줍니다. 동영상에서 우리는 electroporation 실험의 성공 또는 실패를 가져올 수있는 핵심 요소 중 일부를 설명합니다.
이 동영상이 문서에서는 쉽게 MEFs 또는 기타 기본 세포 라인에 대한 최적의 electroporation 조건을 식별하는 MXcell의 electroporation 시스템을 사용하는 방법을 보여줍니다. 많은 사람들이 많은 별도의 실험에 대한 필요성을 없앨 수 동시에 수행하는 실험이나 최적화 조건의 복제에 대한 96 – 웰 플레이트 형식 있습니다. 이 절차를 수행하는 동안, 하나는 가능한 한 빨리 격리 후 건강한 세포를 사용하고 electroporation 버퍼에 일치 electroporation 조건을 사용하는 기억한다.
The authors have nothing to disclose.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Gene Pulser® Electroporation Buffer | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2676 | ||
Gene Pulser MXcell™ Electroporation System | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2670 | ||
Gene Pulser MXcell™ ShockPod™ Cuvette Chamber | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2673 | ||
Gene Pulser MXcell™ Electroporation System With ShockPod™ Cuvette Chamber | Bio-Rad Laboratories, Inc. | 165-2674 |