マウスの錐体光受容体からの単一細胞サクション録音
Summary
我々は、吸引電極を用いてマウスのシングルコーンからフラッシュの応答を記録する方法を説明します。
Abstract
網膜の桿体と錐体光受容体は、光検出のための責任があります。暗闇の中で、外側のセグメントにおける環状ヌクレオチド依存性（CNG）チャネルが開いていて、陽イオンが細胞を脱分極、膜を横切って内側に着実に流れるようになります。光露光では、CNGチャネル、ブロック内向きの陽イオン電流の流れ、および従って細胞過分極の結果の閉鎖をトリガします。光受容体の極性に基づいて、吸引の記録方式は、古典的パッチクランプ法とは異なり、原形質膜を貫通する必要がない、1970年代に開発された<sup> 1</sup>。細胞外液を満たしたしっかりフィットガラスピペットに外側のセグメントを描画するテスト – ストロボ調光時に個々の細胞の電流変化を記録することができます。しかし、この十分に確立された"外側のセグメントイン（OS – IN）"吸引録音ため、マウスの網膜の錐体の割合が低い（3％）とコーンの同定に関する問題点から、マウスのコーンの録音には適していません外側のセグメント。最近、内側セグメントの（IS -の）記録の設定は、録音のピペットに内側のセグメント/光受容体の核領域を描画するために開発された<sup> 2,3</sup>。このビデオでは、我々は単一細胞吸引電極を用いて個々のマウスのコーンphotoresponsesから録音する方法を示します。
Protocol
Discussion
視細胞から単一細胞吸引の記録は3年前に開発されました。それは細胞膜を貫通することなく、光刺激により誘発される膜貫通電流変化を記録することを可能にします。が高いために細胞間接着のために、それは両生類の網膜のようなマウスの網膜から健康なシングルロッドとコーンを分離することは困難であり、それは低い割合（3％）と小さいサイズのため、個々の錐体を見つけるのは難?…
Acknowledgements
失明とEY 02687（ワシントン大学眼科視覚科学の部）防止のための研究から失明、NIHの助成金EY 019312、および無制限の助成金を防止するための研究からキャリア開発賞でサポートされています。
References
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