Summary

عزل خلايا الإنسان الوريد السري غشائي (HUVEC)

Published: April 28, 2007
doi:

Summary

هذا البروتوكول فيديو يوضح العزلة وثقافة الإنسان الخلايا البطانية الوريد السري (HUVEC) من الحبل السري البشري. مرة واحدة معزولة يمكن استخدام هذه الخلايا لتكوين الأوعية الدموية في المختبر فحوصات مثل الفحص الفايبرين محسن الخرزة جل أظهرت أيضا من قبل مختبر هيوز.

Abstract

الأوعية الدموية هي عملية معقدة متعددة الخطوات العملية ، حيث استجابة لمحفزات عائية ، يتم إنشاء السفن الجديدة من الأوعية الدموية الموجودة. وتشمل هذه الخطوات : تدهور انتشار الطابق السفلي ، والغشاء والهجرة (تنبت) من الخلايا البطانية (EC) في المصفوفة خارج الخلية ، والمحاذاة من المفوضية الأوروبية في الحبال ، وتشكيل التجويف ، مفاغرة ، وتشكيل الغشاء القاعدي الجديد. وقد وضعت العديد من فحوصات المختبر لدراسة هذه العملية ، ولكن معظم فقط تحاكي مراحل معينة من الأوعية الدموية ، وتتشابه هذه السفن غالبا ما لا تشبه السفن في الجسم الحي. نحن هنا تدل على وجود الأمثل في المختبر فحص الأوعية الدموية التي تستخدم الإنسان السري EC الوريد والليفية. يلخص هذا النموذج جميع المراحل المبكرة من الأوعية الدموية الرئيسية ، والأهم من السفن عرض شمعة البراءة بين الخلايا محاطة EC الاستقطاب. ويمكن ملاحظتها بسهولة السفن على النقيض من المرحلة المجهري ومرور الزمن ، وانتعشت في شكل نقي للتطبيقات المصب.

Protocol

إجراء وضع الحبل على لوحة نظيفة وربت قبالة الدم الزائد. إجراء تخفيضات جديدة على طرفي الحبل. إدراج 21 02/01 إبرة G مع غمد إبرة بلاستيكية ON ، في الوريد. (وريد هو أكبر الافتتاح ، وتلك هي أصغر ?…

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
0.1% Collagenase       10ml per cord, warmed to 37°C
Tissue culture flasks       T75, one per cord.
Hanks medium        
scissors       sterile
beaker       sterile
50 ml tubes        
check_url/fr/183?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Davis, J., Crampton, S. P., Hughes, C. C. Isolation of Human Umbilical Vein Endothelial Cells (HUVEC). J. Vis. Exp. (3), e183, doi:10.3791/183 (2007).

View Video