Summary

Vomeronasal Epitel Multielectrode Dizi Kayıtlar

Published: March 01, 2010
doi:

Summary

Multielectrode array (MEA) kayıtları nöronların büyük nüfus elektriksel aktivite eğitimi için bir yöntem sağlar. Burada, aynı anda doku uyarıcı fare vomeronasal epitel kayıt MEA hazırlanması ayrıntılar mevcut.

Abstract

Sinir devreleri anlamak yöntemleri aynı anda birçok nöron kayıt gerektirir. Için<em> In vitro</em> Çalışmaları, mevcut teknolojisi düzlemsel multielectrode array (MEA) kayıt. Burada reseptör türleri yüzlerce ifade duyu nöronlarının çeşitli nüfus üzerinden, feromonlar ve sosyal ipuçlarını algılama önemli bir rol oynar fare vomeronasal organ (VNO), çalışmak için ÇÇA kullanımı belge. MEA kayıt kimyasal uyaranlara sunmak için bir robot sıvı işleyicisi ile birleştiren, geniş ve çeşitli bir nöron nüfusun duyusal yanıtları kaydedilebilir. Hazırlık bize fare VNO sağlam neuroepithelium kaldırmak ve birkaç saat için nöronların elektriksel aktivitenin izlenmesi, kimyasal ya da potansiyel ligandlar bir pil ile uyarmak için izin verir. Bu nedenle, bu tekniğin yanı sıra ligand faaliyet değerlendirirken reseptör nöronların özelliklerini keşfetmek için yararlı bir yöntem olarak hizmet vermektedir. Biz vomeronasal epiteli, MEA kayıt ve kimyasal stimülasyon hazırlamak için gerekli teknikleri sunar.

Protocol

Bölüm 1. Elektrik Kayıt Enstrümantasyon Biz, silisyum nitrür ile yalıtılmış 10 mm düz titanyum nitrür elektrotlar düzlemsel multielectrode dizi (ALA Scientific Instruments) kullanın. 60 elektrotlar merkezi-merkezi, 30 mm boşluk ile bir 5×6 ızgara oluşan iki alan olarak düzenlenmiştir. (Diğer yapılandırmalar da mümkündür; elektrotlar ile 10 mm çapında bir kayıt yüzey izole tek nöronların aktivitesi açısından büyük elektrotlar daha iyi.) Elektrik sinyalleri MEA 1060 …

Discussion

Multielectrode dizi kayıtları bize büyük bir nüfusun nöronların eş zamanlı etkinliğini izlemek için izin verir. Bu, özellikle VNO bir duyu sistemi özellikleri problama için yararlı bir araçtır. Ana koku alma sisteminin aksine, VNO sıvı faz uyaranlara algılar. Buna ek olarak, VNO heterojen bir dokudur. Muhtemelen farklı tepki profilleri fare 1 reseptörlerinin yaklaşık 300 farklı türleri vardır. Robotik kol ile birlikte MEA kayıtları bize, güvenilir, nöronlar ve elektrofizyolojik …

Acknowledgements

Biz Kutsal Lab üyelerine teşekkür etmek istiyorum. Bu çalışma, Ulusal Sağırlık ve İletişim Bozuklukları Enstitüsü (R01 DC005964) ve NSF IGERT 0.548.890 (HAA) tarafından desteklenmiştir.

Amerika Birleşik Devletleri Hayvan Refahı yasalar ve Ulusal Sağlık kılavuzların Enstitüleri göre hayvanlar üzerinde deneyler yapıldı ve Washington Üniversitesi Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından kabul edildi.

References

  1. Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
  2. Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
  3. Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).

Play Video

Citer Cet Article
Arnson, H. A., Fu, X., Holy, T. E. Multielectrode Array Recordings of the Vomeronasal Epithelium. J. Vis. Exp. (37), e1845, doi:10.3791/1845 (2010).

View Video