فأري الورم الكبدي Bioluminescent النموذجي
Summary
توضح هذه المقالة إجراء لتحريض مثلي bioluminescent أورام الكبد في الفئران ، وتحليل لاحقة من نمو الورم محصورا في الكبد باستخدام يعيش التلألؤ الجسم كله التصوير.
Abstract
هذا الفيديو يصف إنشاء الانبثاث الكبد في نموذج الفأر التي يمكن تحليلها لاحقا من قبل bioluminescent التصوير. تدار خلايا الورم على وجه التحديد إلى الكبد للحث على وجود ورم في الكبد المترجمة ، عن طريق تعبئة والطحال وتقسيمه الى قسمين ، وترك الحبل على الغارب في الأوعية الدموية عنيق لكل نصف الطحال. يتم تلقيح خلايا سرطان الرئة لويس التي تعبر عن هذا الجين constitutively luciferase يراعة (luc1) إلى واحد نصفي الطحال وهي مقطوعة ثم 10 دقيقة في وقت لاحق. ويترك الآخر نصفي الطحال سليمة ، وعاد إلى البطن. ويمكن رصد نمو الورم في الكبد بواسطة التصوير تلألؤ بيولوجي باستخدام التصوير IVIS نظام الجسم كله. التصوير الكمي لنمو الورم باستخدام IVIS يوفر الكميات الدقيقة من الخلايا السرطانية قابلة للحياة. يشار إلى موت الخلايا والأورام نخر بسبب العلاج من تعاطي المخدرات في وقت مبكر عن طريق تخفيض في إشارة bioluminescent. هذا النموذج يسمح الماوس عن التحقيق في الآليات الكامنة الورم النقيلي خلايا البقاء والنمو ، ويمكن استخدامها لتقييم علاجات من ورم خبيث في الكبد.
Protocol
Discussion
وضع موثوق بها في النماذج الحية لدراسة الكبد الانبثاث أصبحت متزايدة الأهمية مع ظهور استراتيجيات علاجية جديدة. لدراسة دقيقة لوضع استراتيجيات جديدة ونماذج حيوانية ينبغي أن يكون من السهل نسبيا على أداء وشكل عددا كبيرا من ورم خبيث ، وإشراك جميع الخطوات من تتال?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وقد تم تمويل هذا العمل من خلال صندوق كورك جنوب مستشفى جامعة فيكتوريا في مستشفى الثدي ، وجمعية السرطان الأيرلندية (CRI07TAN) ومركز أبحاث السرطان كورك. وكان لويس خط الخلية الرئة معربا عن ستابلي luciferase هدية عينية من الدكتورة كارين Jooss ، خلية جينيسيس ، وشركة ، سان فرانسيسكو ، الولايات المتحدة الأمريكية.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | ||
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | ||
| Ketamine | Vetoquinol | |||
| Xylazine | Vetoquinol | |||
| Carprofen | Vetoquinol | |||
| Videne | Ecolab, Leeds, UK | |||
| Vicryl 4-0 suture | Ethicon | |||
| PDS 4-0 suture | Ethicon | |||
| Prolene 4-0 suture | Ethicon | |||
| Firefly Luciferin | Biosynth, Zurich, Switzerland |
References
- Kasuya, H. Mouse models of subcutaneous spleen reservoir for multiple portal venous injections to treat liver malignancies. Cancer Res. 65, 3823-3827 (2005).
- Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H. Liver metastasis models of human colorectal carcinoma established in nude mice by orthotopic transplantation and their biologic characteristic. World J Gastroenterol. 4, 409-411 (1998).
- Li, Z. Y., Ni, S., Yang, X., Kiviat, N., Lieber, A. Xenograft models for liver metastasis: Relationship between tumor morphology and adenovirus vector transduction. Mol Ther. 9, 650-657 (2004).
- Cashman, J. P. Immune gene therapy as a neoadjuvant to surgical excision to control metastatic cancers. Cancer Lett. , (2008).
