Cet article décrit une procédure pour l'induction de tumeurs du foie orthotopique chez des souris bioluminescentes, et l'analyse ultérieure de la croissance tumorale limitées au foie en utilisant l'imagerie en direct toute la luminescence du corps.
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Article de méthode
Modèle murin Bioluminescent tumeurs hépatiques
Dans cet article
Résumé
Résumé
Cette vidéo décrit l'établissement de métastases hépatiques dans un modèle de souris qui peut ensuite être analysé par imagerie par bioluminescence. Les cellules tumorales sont administrés spécifiquement dans le foie pour induire une tumeur hépatique localisée, via la mobilisation de la rate et le fractionnement en deux, laissant intact le pédicule vasculaire pour chaque moitié de la rate. Cellules de carcinome pulmonaire de Lewis qui expriment constitutivement le gène luciférase de luciole (luc1) sont inoculées dans un hémi-rate qui est ensuite réséqué 10 minutes plus tard. L'autre hémi-rate est laissé intact et est retourné à l'abdomen. La croissance des tumeurs du foie peuvent être surveillés par imagerie par bioluminescence en utilisant l'imagerie IVIS ensemble du système du corps. Imagerie quantitative de la croissance tumorale en utilisant IVIS fournit une quantification précise des cellules tumorales viables. La mort des cellules tumorales et la nécrose due à un traitement médicamenteux est indiqué au début par une réduction dans le signal de bioluminescence. Ce modèle de souris permet d'étudier les mécanismes sous-jacents métastatique des tumeurs cellule de survie et de croissance et peut être utilisé pour l'évaluation des traitements des métastases hépatiques.
Protocole
Présentation
Le foie est souvent le premier site de la maladie métastatique et peut être le seul site de dissémination dans autant que 30 à 40% des patients ayant une maladie avancée. Toutefois les options pour traiter des tumeurs hépatiques métastatiques sont rares avec une minorité de patients appropriés pour la résection et seulement 23% des intervenants majeurs aux agents chimiothérapeutiques. La recherche préclinique dans ce domaine ont été limitées par l'absence d'un modèle de souris adaptée à l'étude des maladies hépatiques isolées. Nous décrivons une approche split-rate qui peuvent être utilisées pour déterminer de manière sûre unif....
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Discussion
Le développement de la fiabilité des modèles in vivo pour l'étude des métastases hépatiques est de plus en plus important avec l'avènement de nouvelles stratégies thérapeutiques. Pour l'étude précise de nouvelles stratégies, des modèles animaux devrait être relativement facile à réaliser, forment un nombre significatif de métastases, impliquer toutes les étapes de la cascade métastatique et ont un système rapporteur qui permet la détection et le comptage d'un nombre limité de cellules m.......
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Déclarations de divulgation
Aucun conflit d'intérêt déclaré.
Remerciements
Ce travail a été financé par le Cork South Victoria Infirmary Hospital de l'Université de fonds du sein, cancer de la Société irlandaise (CRI07TAN) et le Centre de recherche contre le cancer Cork. Ligne de cellules du poumon de Lewis exprimant de façon stable la luciférase a été un cadeau du genre Dr. Karin Jooss, Cell Genesys, Inc, San Francisco, USA.
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Matériaux
| Nom | Entreprise | Numéro de catalogue | Commentaires |
|---|---|---|---|
| DMEM | Sigma-Aldrich | D6429 | |
| PBS | Sigma-Aldrich | D8537 | |
| Kétamine | Vétoquinol | ||
| Xylazine | Vétoquinol | ||
| Carprofène | Vétoquinol | ||
| Vidène | Ecolab | ||
| Fil de suture Vicryl 4-0 | Ethicon Inc. | ||
| Fil de suture PDS 4-0 | Ethicon Inc. | ||
| Fil de suture Prolene 4-0 | Ethicon Inc. | ||
| Luciférine de luciole | Biosynth International, Inc |
Références
- Kasuya, H. Mouse models of subcutaneous spleen reservoir for multiple portal venous injections to treat liver malignancies. Cancer Res. 65, 3823-3827 (2005).
- Liu, Q. Z., Tuo, C. W., Wang, B., Wu, B. Q., Zhang, Y. H.
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Réimpressions et autorisations
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