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JoVE Journal > Biology
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Biologie
闪存冻结和Cryosectioning E12.5小鼠脑
Published: May 28, 2007
doi:
10.3791/198
D. Spencer Currle
,
Edwin S. Monuki
1
Department of Developmental and Cell Biology
,
University of California, Irvine (UCI)
Summary
这个视频展示了闪光冻结和从小鼠胚胎脑组织切片技术。使用低温恒温器的有用提示,其中包括排除故障的方法,可以用来切割,以确保由此产生的组织部分无裂缝和其他扭曲。
Protocol
修复所需的时间为4%多聚甲醛的PBS组织。 蔗糖注入组织(cryoprotection) 请在PBS W / V在2059管30%的蔗糖溶液。 在PBS冲洗组织的3倍(与摇摆〜5分钟)。 将组织30%的蔗糖溶液中。组织不会下沉。 组织放置在4℃过夜,或直至它已经沉没。 标签适当大小cryomold信息和导向。 填写cryomold与华侨城(避免气泡)。 转移组织华侨城浴和大衣与华侨城组…
Materials
Material Name
Type
Company
Catalogue Number
Comment
Tissue-Tek Cryomold
Ted Pella, Inc.
27181
O.C.T.
Ted Pella, Inc
27050
Sucrose solution
30% sucrose solution in PBS w/v
paraformaldehyde
4% paraformaldehyde in PBS
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Tags
Flash Freezing
Cryosectioning
E12.5
Mouse Brain
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DOI
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Citer Cet Article
Currle, D. S., Monuki, E. S. Flash Freezing and Cryosectioning E12.5 Mouse Brain.
J. Vis. Exp.
(4), e198, doi:10.3791/198 (2007).
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