C. elegans Gonad Extrusion: En snabb dissekeringsteknik
Published: April 30, 2023
Abstract
Källa: Gervaise, A. L. och Arur, S. Spatial and Temporal Analysis of Active ERK in the C. elegans Germline. J. Vis. Exp. (2016).
Denna video beskriver en metod för att dissekera gonads från vuxna C. elegans hermafroditer, vilket resulterar i vävnader som är lämpliga för immunostaining och fluorescerande avbildning.
Protocol
Detta protokoll är ett utdrag ur Gervaise och Arur, Spatial and Temporal Analysis of Active ERK i C. elegans Germline. J. Vis. Exp. (2016). 1. Dissekering av vuxna maskar för att få gonads Välj 100 – 150 WT (N2) eller önskad genotyp av maskar i önskat och specifikt utvecklingsstadium (L1, L2, L3, L4, vuxen, etc.)i 100…
Materials
| Flat bottom glass watch dish | Agar Scientific | AGL4161 | We use glass because dissected gonads often stick to plastic |
| 25 G needles | BD PrecisionGlide | 305122 | |
| Syringes (could be 1 or 5 mL) | BD Syringes | 1 mL: BD 309659 | |
| Microscope slides (25 x 75 x 1.0 mm) | Fisherbrand | 12-550-343 | |
| Clinical bench top centrifuge | |||
| *M9 solution | |||
| Levamisole | Sigma | L9756 | |
| *M9 Buffer Recipe | 3 g KH2PO4, 6 g Na2HPO4, 5 g NaCl, 1 mL 1 M MgSO4, H2O to 1 L. |
Citer Cet Article
C. elegans Gonad Extrusion: A Rapid Dissection Technique. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20131, doi: (2023).