एक वयस्क मक्खी से मिडगुट का विच्छेदन: पाचन तंत्र को अलग करने के लिए एक विधि

Abstract

स्रोत: Tauc, एच.M, एट अल वयस्क ड्रोसोफिला मिडगुट्स से आंतों स्टेम सेल को FACS द्वारा अलग करने के लिए उम्र बढ़ने के दौरान स्टेम सेल व्यवहार का अध्ययन । जे विस एक्सप्रेस। (2014).

इस वीडियो में, हम आंतों की स्टेम कोशिकाओं को अलग करने के लिए वयस्क ड्रोसोफिला आंत के विच्छेदन और एकल कोशिका वियोजन और FACS के लिए उपयुक्त मिडगट्स के संग्रह को उजागर करते हैं।

Protocol

यह प्रोटोकॉल Tauc et al.,वयस्क ड्रोसोफिला मिडगट्स से आंतों स्टेम सेल को FACS द्वारा अलग करने के लिए उम्र बढ़ने के दौरान स्टेम सेल व्यवहार का अध्ययन करने के लिए, जे विस Exp है। (2014). नोट:</stron…

Materials

Forceps: Dumont, Inox Biologie #5	Fine Science Tools	11252-20
SefarNitex 03-150um/38 (35 µm nylon mesh)	Sefar	3A03-0150-102-00
Falcon 5 ml Round Bottom Polystyrene Test Tube with Cell Strainer Snap Cap	Corning	352235
Polymax 1040	Heidolph	543-42210-00
Albumin from bovine serum (BSA)	Sigma	A4503-50G
0.5% Trypsin-EDTA	Invitrogen	15400-054	Trypsin obtained from a different company most likely has a different activity and the duration of the trypsin digest has to be adjusted accordingly.
SYTOX Blue Dead Cell Stain for flow cytometry	Life Technologies	S34857
RNAlater Stabilization Solution	Life Technologies	AM7023	Other solutions, e.g., Trizol can be used for subsequent RNA isolation
FACSAria II cell sorter	Becton Dickinson		Turn on one hour prior to sorting