성인 비행에서 Midgut의 해부 : 소화관을 격리하는 방법
Published: April 30, 2023
Abstract
출처: Tauc, H.M., 외. 노화 중 줄기 세포 행동을 연구하기 위해 FACS에 의해 성인 Drosophila Midguts에서 장 줄기 세포를 분리. J. 비스 익스펙. (2014).
이 비디오에서는 장 줄기 세포를 격리하기 위해 성인 Drosophila 장의 해부와 단일 세포 해리 및 FACS에 적합한 미드 구트 컬렉션을 강조합니다.
Protocol
이 프로토콜은 Tauc 외에서발췌 ., 노화 중 줄기 세포 행동을 연구하기 위해 FACS에 의해 성인 Drosophila Midguts에서 장 줄기 세포를 분리, J. Vis. Exp. (2014). 참고: 이 프로토콜이 FAC 정렬에 의해 ISC를 분리하는 데 처음으로 사용되는 경우, 다음 컨트롤은 처음에 FACS 매개 변수를 제대로 설정하기 위해 필수입니다 : 야생 유형에서 …
Materials
| Forceps: Dumont, Inox Biologie #5 | Fine Science Tools | 11252-20 | |
| SefarNitex 03-150um/38 (35 µm nylon mesh) | Sefar | 3A03-0150-102-00 | |
| Falcon 5 ml Round Bottom Polystyrene Test Tube with Cell Strainer Snap Cap | Corning | 352235 | |
| Polymax 1040 | Heidolph | 543-42210-00 | |
| Albumin from bovine serum (BSA) | Sigma | A4503-50G | |
| 0.5% Trypsin-EDTA | Invitrogen | 15400-054 | Trypsin obtained from a different company most likely has a different activity and the duration of the trypsin digest has to be adjusted accordingly. |
| SYTOX Blue Dead Cell Stain for flow cytometry | Life Technologies | S34857 | |
| RNAlater Stabilization Solution | Life Technologies | AM7023 | Other solutions, e.g., Trizol can be used for subsequent RNA isolation |
| FACSAria II cell sorter | Becton Dickinson | Turn on one hour prior to sorting |
Citer Cet Article
Dissection of the Midgut from an Adult Fly: A Method for Isolating the Digestive Tract. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20150, doi: (2023).