Beutefang-Assay: Eine Methode, um das Beutefangverhalten von Zebrafischlarven zu untersuchen

Abstract

Quelle: Muto, A., et al. Ablation einer neuronalen Population mit einem Zwei-Photonen-Laser und seine Bewertung mit Kalzium-Bildgebung und Verhaltensaufzeichnung in Zebrafisch-Larven.  J. Vis. (2018)

Dieses Video beschreibt den Beuteerfassungstest. Das Video behandelt die Methode zur Untersuchung des Beuteerfassungsverhaltens von Zebrafischlarven nach der Laserablation bestimmter Neuronen.

Protocol

1. Beurteilung der Verhaltensfolgen nach Laserablation Richten Sie ein Verhaltensaufzeichnungssystem ein, das aus einem Stereoskop besteht, das mit einer Videokamera ausgestattet ist. Verwenden Sie eine Kamera mit einer geeigneten Bildaufnahmesoftware, kommerziell oder maßgeschneidert (Abbildung 1A). Optimieren Sie den Beleuchtungszustand, damit das Paramecium durch Bildverarbeitung erkannt werden kann. Verwenden Sie beispielsweise ein ringweißes LED-Licht mit einem Abstand…

Representative Results

Abbildung 1. Beuteerfassungstest und repräsentative Daten in laserabilierten Zebrafischlarven. (A) Verhaltensaufzeichnungssystem. Das Stereomikroskop war mit einer CMOS-Kamera ausgestattet. Bilder wurden mit einem benutzerdefinierten Skript erstellt. (B) Komponenten des Beleuchtungssystems. Ein graues Papier, ein Glasdiffusor, weißes LED-Ringlicht, Diffusor, ein maßgeschneiderter Abst…

Materials

Imageing Chambers	Grace Bio-Labs	CoverWell Imaging Chambers PCIA-2.5	Used as a behavioral recording chamber
ORCA-Flash4.0	Hamamatsu Photonics	Model:C11440-22CU	A scientific CMOS camera
SZX7	Olympus		Stereoscope
A ring LED light	CCS	Model: LDR2-100SW2-LA	White LED
Secure-Seal Hybridization Chamber Gasket, 8 chambers, 9 mm diameter x 0.8 mm depth	Molecular Probes	Catalogue # S-24732	Used as a recording chamber in Ca imaging