Paring en ei-enscenering: een methode om embryo's te genereren en ze te sorteren op ontwikkelingsfase
Published: April 30, 2023
Abstract
Bron: Hostelley T.L., et al. Monstervoorbereiding en -analyse van op RNASeq gebaseerde genexpressiegegevens van zebravissen. J.Vis. Exp. (2017)
Het artikel beschrijft een protocol om zebravisembryo’s te genereren door natuurlijke paring en het sorteren van hun ontwikkelingsstadia. Het protocol wordt verder gebruikt voor de analyse van pancreas β-cellen met behulp van transgene vissen.
Protocol
1. Embryo’s genereren door natuurlijke paring Kweekembryo’s tot 3 maanden oud, reproductieve rijpheid. Scheid volwassen mannelijke en vrouwelijke vissen van de gewenste stam in verdeelde paringstanks op de avond voor het verzamelen van embryo’s en voeg 2 mannetjes en 3 vrouwtjes toe aan elke tank.OPMERKING: Het gebruik van de transgene insulin2a:mCherry fluorescerende reporter stam maakte de analyse van pancreas β-cellen mogelijk. Breng vis ove…
Materials
| ins2a:mCherry | ZIRC | ZL1483 | |
| Mating tanks 1.0L Crossing Tank Set | Aquaneering | ZHCT100 | |
| Dissecting Microscope | Zeiss |
Citer Cet Article
Mating and Egg Staging: A Method to Generate Embryos and Sort Them by Developmental Stage. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20183, doi: (2023).