짝짓기 및 계란 준비 : 배아를 생성하고 발달 단계로 정렬하는 방법

Abstract

출처: 호스텔리 T.L., 외. 제브라피시로부터 RNASeq 기반 유전자 발현 데이터의 샘플 준비 및 분석. J. 비스 익스펙. (2017)

이 기사는 자연적인 짝짓기 및 발달 단계를 정렬하여 제브라피시 배아를 생성하는 프로토콜을 설명합니다. 프로토콜은 형질 전환 물고기를 사용하여 췌장 β 세포의 분석을 위해 더 사용된다.

Protocol

1. 자연 짝짓기를 통해 배아 생성 배양 배아 3 개월, 생식 성숙. 원하는 균주에서 성인 남성과 암컷 물고기를 배아 수집 전 저녁에 분할 된 짝짓기 탱크로 분리하고 각 탱크에 2 명의 수컷과 3 명의 암컷을 추가합니다.참고: 형질형 인슐린2a:mCherry 형광 기자 균주는 췌장 β 세포의 분석을 허용했다. 물고기를 신선한 시스템 물로 짝짓기 탱크로 …

Materials

ins2a:mCherry	ZIRC	ZL1483
Mating tanks 1.0L Crossing Tank Set	Aquaneering	ZHCT100
Dissecting Microscope	Zeiss