Parring og eggoppsamling: En metode for å generere embryoer og sortere dem etter utviklingsstadium
Published: April 30, 2023
Abstract
Kilde: Hostelley T.L., et al. Prøvepreparering og analyse av RNASeq-baserte genuttrykksdata fra sebrafisk. J. Vis. Utt. (2017)
Artikkelen beskriver en protokoll for å generere sebrafiskembryoer gjennom naturlig parring og sortering av utviklingsstadier. Protokollen brukes videre til analyse av bukspyttkjertelen β celler ved hjelp av transgene fisk.
Protocol
1. Generere embryoer gjennom naturlig parring Kultur embryoer til 3 måneder, reproduktiv modenhet. Segregate voksen mannlig og kvinnelig fisk fra ønsket stamme i delte parringstanker på kvelden før embryooppsamling, og legg til 2 menn og 3 kvinner til hver tank.MERK:Bruk av den transgene insulin2a:mCherry fluorescerende reporterstammen tillot analyse av bukspyttkjertel β celler. Overfør fisk til parringstanken med ferskvann og fjern skille…
Materials
| ins2a:mCherry | ZIRC | ZL1483 | |
| Mating tanks 1.0L Crossing Tank Set | Aquaneering | ZHCT100 | |
| Dissecting Microscope | Zeiss |
Citer Cet Article
Mating and Egg Staging: A Method to Generate Embryos and Sort Them by Developmental Stage. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20183, doi: (2023).