In Vivo Elettroporazione: un metodo site-specific per trasfetto Zebrafish

Abstract

Fonte: Durovic, T., et al. Metodo di elettroporazione per la consegna in vivo di DNA plasmide nel telencefalo di zebrafish adulto. J. Vis. Exp.

Questo video descrive l’elettroporazione in vivo, che è una tecnica per la consegna del DNA nelle cellule ependimogliali nei pesci zebra adulti.

Protocol

1. Elettroporazione Rimuovere il pesce dall’installazione dell’iniezione tenendolo ancora nella spugna. Immergere il lato interno della punta degli elettrodi nel gel ad ultrasuoni. Coprire il telencefalo di pesce con una piccola quantità di gel ad ultrasuoni. Posizionare la testa del pesce tra gli elettrodi, posizionando l’elettrodo positivo sul lato ventrale della testa del pesce e l’elettrodo negativo sul lato dorsale (Figura 1C), pur tenendo il corpo del pesce …

Representative Results

Figura 1: Rappresentazione schematica della sezione coronale del telencefalo zebrafish eluso. (A) Schema di una sezione coronale di telencefalo di zebrafish, che evidenzia la posizione delle cellule ependimogliali, che rivestono la superficie ventricolare e costruino la parete ventricolare ventrale. Lo strato ependimale dorsale sta colmando i due emisferi e copre il ventricolo (V), situato tra due strati …

Materials

Ultrasound gel	SignaGel, Parker laboratories INC	15-60	Electrode Gel
BTX Tweezertrodes Electrodes	Platinum Tweezertrode, BTX Harvard Apparatus	45-0486	1mm diameter
Electroporation device	BTX ECM830 Square Wave Electroporation System, BTX Harvard Apparatus	45-0662