海马脑片的器官型检查神经元损伤的文化模式
Summary
organoptypic海马脑片培养模型是一个<em>在体外</em>模型来研究各种范式的神经元损伤。在这篇文章中，我们描述了片文化和量化神经元损伤的方法。
Abstract
器官型海马脑片文化是在体外培养方法，研究神经元损伤的机制，其中的基本结构和组成的海马 ，相对保留了1。器官型培养系统可以为研究神经元，星形胶质细胞和小胶质细胞的影响，但作为体内的编制，不处理的血 液流动，或招聘周围炎性细胞的影响。为此，这种文化的方法是经常使用的研究海马锥体神经元的兴奋性毒性和缺氧性损伤，但也被用于检查的炎症反应。在此我们描述了从产后啮齿类动物的大脑产生的海马脑片培养，管理毒性刺激，诱导神经元损伤和化验，并量化海马神经元死亡的方法。
Protocol
1。制备在开始之前，组装所需的手术器械，剥离和文化传媒，7日龄大鼠或小鼠幼仔。该协议是相同的小鼠和大鼠的准备。 （一）材料和设备操作剪刀（直线长度6“，猫＃RS6818，Roboz，盖士堡，MD） 微解剖剪刀，（长度为4的“猫＃RS5910。Roboz，马里兰州盖瑟斯堡） 碳钢杜蒙镊子（猫＃RS – 5045.Roboz，盖士堡，MD） 改性玻璃“转让?…
Discussion
要遵循确保重复性和一致的结果，复制实验时，有两个重要的点。首先，重要的是让海马年龄为12-14天前实验。片隔离，是一个重大的小胶质细胞的反应，和小胶质细胞在一段时间内保持激活状态，回到休息分枝国家发生的第10 天， 在体外3,6 ，。其次，意味着PI荧光强度成正比受伤的细胞数量4。顺序荧光是在三个时间点：（一）在T 0之前，NMDA或OGD刺激措施，自发?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
由美国心脏协会，美国衰老研究联合会，March of Dimes的NINDS，
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Tags
Organotypic Hippocampal Slice CultureNeuronal InjuryIn Vitro MethodHippocampusNeuronal ArchitectureCompositionOrganotypic Culture SystemAstrocytic EffectsMicroglial EffectsEx Vivo PreparationBlood Flow EffectsPeripheral Inflammatory CellsExcitotoxic InjuryHypoxic InjuryPyramidal NeuronsInflammatory ResponseMethods For Generating Hippocampal Slice CulturesToxic StimuliAssaying And Quantifying Neuronal Death
Citer Cet Article
Wang, Q., Andreasson, K. The Organotypic Hippocampal Slice Culture Model for Examining Neuronal Injury. J. Vis. Exp. (44), e2106, doi:10.3791/2106 (2010).