Этот протокол описывает изоляции и распада тканей медуллобластомой мыши и последующем аллотрансплантации опухолевых клеток в иммунитетом мышей трансплантации, с тем чтобы начать вторичные медуллобластомой.
Abstract
Медуллобластомой является наиболее распространенным педиатрической опухоли нервной системы. Большой объем исследований на животных было сосредоточено на мозжечковой гранул нейрона прекурсоров (CGNPs) в качестве клеточной из-за происхождения медуллобластомой 1-4. Тем не менее, разнообразные клинические проявления медуллобластомой подтипов в человеческом пациентов (узловой, вызывающий развитие фиброзной ткани, классические и большую клетку / анапластическая), а также тот факт, что медуллобластомой находится в подмножество человека пациентов без внематочной выражение CGNP маркер 5, показывают, что клеточном и молекулярном происхождении медуллобластомой являются более сложными и далеко не полностью расшифрован. Поэтому важно определить, есть ли альтернативные опухоли медуллобластомой клеточной от происхождения на основании которых камерного типа конкретной терапевтической модальности могут быть разработаны. С этой целью, внутричерепная ортотопической аллотрансплантации генетически отмеченные типы клеток опухоли с последующим анализом вторичного развития опухоли у реципиентов позволит определения сотовой происхождении опухоли, инициирующие клетки. Здесь мы опишем экспериментальный протокол для внутричерепного ортотопической аллотрансплантации медуллобластомы клетки, полученные из первичной опухоли ткани, и эта процедура может также использоваться для пересадки клетки от установленных клеточных линий.
Protocol
1. Микро-рассечение опухоль мозжечка и диссоциация опухолевой ткани Восстановление опухолевой ткани Больных мышей с медуллобластомой часто runted и отображения гидроцефалия и типичных неврологических симптомов, включая паралич задних и неудачи, чтобы восстановить п…
Discussion
Несколько важных факторов для успешного ячейки медуллобластомой аллотрансплантации, что дает вторичное образование опухоли в следующем: Во-первых, использовать только 50% Accutase для ткани диссоциации и не по-дайджест ткани, как длительное лечение фермента приводит к значительному сниже…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Это исследование было поддержано грантами Вандербильт-Инграм онкологический центр поддержки Грант (P30 CA068485), опухоли мозга у детей и Фонд Национальных институтов здравоохранения (NS042205).
Huang, X., Sarangi, A., Ketova, T., Litingtung, Y., Cooper, M. K., Chiang, C. Intracranial Orthotopic Allografting of Medulloblastoma Cells in Immunocompromised Mice. J. Vis. Exp. (44), e2153, doi:10.3791/2153 (2010).