Denna video visar hur man framkalla autoimmuna hypophysitis i SJL möss och hur man kan bedöma dess svårighetsgrad av histopatologi.
Abstract
Autoimmuna hypophysitis kan reproduceras experimentellt genom injektion av hypofysen proteiner blandat med en adjuvans i mottagliga möss 1. Musmodeller ge oss möjlighet att studera hur sjukdomar utvecklas, ofta ger en bra replik av samma processer som sker hos människor. För vissa autoimmuna sjukdomar, som typ 1A-diabetes, det finns modeller (NOD musen) som spontant utvecklar en sjukdom som liknar den mänskliga motsvarighet. För många andra autoimmuna sjukdomar måste dock den modell som ska framkallas experimentellt. En gemensam strategi i detta avseende är att injicera musen med en dominerande antigen från orgeln som studeras. Till exempel, utredare intresserad av autoimmun tyreoidit injicerar möss med tyreoglobulin 2, och de som är intresserade av myastenia gravis injicera dem med acetylkolin-receptorn 3. Om autoantigen för en viss autoimmun sjukdom är inte känd, utredare injicera en råprotein utdrag ur orgeln är målet för den autoimmuna reaktionen. För autoimmuna hypophysitis, patogena autoantigen (s) återstår att identifiera 4, och därmed en rå hypofysen protein preparatet används. I denna video artikeln visar vi hur du kan få experimentell autoimmun hypophysitis i SJL möss.
Protocol
Experimentell Protokoll När hypofysen immunogen är beredd (se anknytande artikel) är det injiceras subkutant i SJL möss (The Jackson Laboratories, lager 000.686). En andra identiska injektionen upprepas 7 dagar senare. Möss används sedan för att samla in vivo och efter slakt resultat. Steg 1. Subkutan injektion av hypofysen immunogen i SJL möss Möss är först bedövas genom att injicera 0,5 ml 20 mg / ml 2,2,2-Tribromoe…
Discussion
Fyra tekniker har rapporterats framkalla hypophysitis hos försöksdjur. Tekniken beskrivs i denna artikel, som är den injektion av hypofysen proteiner blandat med Freund s adjuvans, är den äldsta, med anor från 1967 6, och har förbättrats på senare tid 1. Andra tekniker är injektion av lösliga glykoproteiner rubellavirus 1992 7, stereotaktisk injektion av ett adenovirus direkt i hypofysen i 2002 8, och transplantation av hypofys från en råtta stam under njuren kaps…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Detta arbete stöddes av NIH bidrag DK080351 till PC, och genom en generös gåva av Terry och Kristine Gore familj.
Rotondo, F., Quintanar-Stephano, A., Asa, S. L., Lombardero, M., Berczi, I., Scheithauer, B. W., Horvath, E., Kovacs, K. Adenohypophysitis in rat pituitary allografts.Int J Exp Pathol. , (2010).
Landek-Salgado, M. A., Tzou, S., Kimura, H., Caturegli, P. Induction of Experimental Autoimmune Hypophysitis in SJL Mice. J. Vis. Exp. (46), e2182, doi:10.3791/2182 (2010).