성인에서 Oenocytes의 해부 Drosophila melanogaster</em
Summary
곤충에서 oenocytes는 cuticular 탄화 수소 화합물을 생산합니다. 이러한 화합물은 건조로부터 보호하고 화학 커뮤니케이 션을 촉진한다. 여기 우리는 성인에서 oenocytes을 분리하는 데 사용되는 절개 기법을 보여줍니다<em> Drosophila melanogaster</em>이 준비가 탄화 수소 합성에 관련된 유전자 연구를 활용할 수있는 방법을 보여줍니다.
Abstract
에<em> Drosophila melanogaster</em> 다른 곤충과 같이 탄화 수소 화합물의 주로 구성된 표피의 바깥쪽 표면에 밀랍 계층, 건조 및 기타 환경 문제에 대한 보호를 제공합니다. (CHC)이 cuticular 탄화 수소의 몇 가지 화합물은 또한 semiochemical 신호로서 기능하고, 같은 같은 종의 구성원 간의 커뮤니케이 션을 pheromonal 중재, 또는 다른 종, 그리고 영향을 미치는 행동 사이에 어떤 경우 인치 oenocytes로 불리는 특수 세포 CHC 합성에 대한 기본 사이트로 간주된다. 그러나, 비교적 작은 biosynthetic, 교통 및 CHC 출력에 기여 증착 경로의 규정에 oenocytes의 참여에 관한 알려져있다. 전과 파일은 화학 통신, 건조 저항, 그리고 면역성을 포함하여 곤충 생물학의 여러 측면에서 재생하는 중요한 역할을 감안할 때, 그것은 이러한 전문화된 세포 내에서 CHC 생산의 분자 및 유전자 조절에 큰 이해를 얻을 것이 중요합니다. 의 성인 oenocytes<em> D. melanogaster</em> 복부 외피 내에 있으며, metamerically 각 복부 세그먼트의 내부 cuticular 표면을 따라 방사 리본과 같은 클러스터에서 못하였 느니라 있습니다. 이 동영상이 문서에서 우리는 성인에서 oenocytes의 준비를 위해 사용되는 절개 기법을 보여줍니다<em> D. melanogaster</em>. 특히, 우리는 (1) 방법 등심은 어른 준비에 대한 자세한 단계별 데모를 제공합니다<em> Drosophila</em> 복부 (2) 어떻게 oenocytes를 식별하고 다른 조직에서 그들을 분별하고, (3) 어떻게 복부 외피에서 그대로 oenocyte 클러스터를 제거합니다. 이 준비가 탄화 수소 합성에 관련된 유전자의 표현을 검사하는 데 사용할 수있는 방법에 대한 간략한 실험 일러스트가 포함되어 있습니다. 해부를 준비 언급된 성인 과일 파리에서 oenocyte 기능의 상세한 분자와 유전자 분석을위한 수 보여주었다.
Protocol
Discussion
이 동영상이 문서에서 우리는 성인에서 oenocytes의 준비에 대한 자세한 해부 프로토콜을 제시 D. 분자 분석을 위해 적합한 방식으로 melanogaster. 간략 텍스트 기반의 계정 절개 방법의 대부분은 다른이 설명되었고, 그 결과 oenocyte 준비는 RNA와 단백질이 모두의 추출에 적합한 것으로 증명되었습니다. 이 준비를 사용하여 그것은 또한 explanted oenocytes의 culturing에 대한 방법?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는이 비디오 문서의 촬영에서 그녀의 도움을 Amsale 잠시 거기서 가만히 감사하고 싶습니다. 이 작품은 CIHR, NSERC과 JDL하는 CRC의 보조금에 의해 투자되었다.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Sylgard | Dow Corning | |||
| Tungsten Wire | Ted Pella, Inc. | 27-11 | 0.005”/20’ | |
| Forceps | Dumont | 11252-30 | #5 | |
| Shields and Sang M3 Insect Medium | Sigma | S3652 | ||
| RNeasy Micro Kit | Qiagen | 74004 | ||
| qScript cDNA Synthesis Kit | Quanta Biosciences | 95047-100 | ||
| Monoject Hypodermic Needle | Harvard Apparatus | 722289 | 20G1 with aluminum hub |
References
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