פיתחנו hindlimb alternant פריקה מודל בעכברים. היתרון העיקרי של השיטה שלנו hindlimb זנב טבעת פריקה על הטכניקה המקובלת זנב המתיחה מורי-הולטון היא הליך פשוט פשוט זה ממזער הלחץ על החיה.
מורי-הולטון hindlimb פריקה (האוניברסיטה העברית) היא שיטה מקובלת הלאומי לאווירונאוטיקה וחלל המינהל (נאס"א) קרקעיים מודל לחקר ניוון, חוסר שימוש במכרסמים 4-6. המחקר שלנו להעריך שיטה alternant את הטכניקה זהב סטנדרטי מורי-הולטון זנב המתיחה HU בעכברים. חמישים וארבע נקבות עכברים (4-8 מו.) היו האוניברסיטה העברית במשך 14 ימים (n = 34) או 28 ימים (n = 20). השחזור HU הוערכה לאחר 3 ימים של ambulation כלוב נורמלי הבאים HU (n = 22). העכברים מתאימים גיל (n = 76) שימש נושאת משקל שולטת.
לפני HU זנב טבעת נוצרה עם חוט פלדה סטרילי 2-0 כירורגית שהועברה דרך ה -5, ה 6 או ה 7 בין השדרה שטח דיסק בצורת לזירה שממנה העכברים הושעו. מיקום החוליות עבור טבעת הזנב נבחר כראוי איזון משקל הגוף החי בלי להתערב עם עשיית הצרכים.
אנחנו נקבע את ההצלחה של טכניקה זו על ידי האוניברסיטה העברית רומן בהערכת משקל הגוף לפני ואחרי האוניברסיטה העברית, תואר של ניוון soleus, ו HU מסת הכליה הבאה. משקל גוף של עכברים לפני האוניברסיטה (24.3 ± 2.9g) לא ירידה משמעותית מיד לאחר 14d של האוניברסיטה העברית (22.7 ± 1.9g), 28d של האוניברסיטה העברית (21.3 + 2.1g) או לאחר התאוששות 3 ימים (24.0 ± 1.8g) . מסת שריר Soleus ירד באופן משמעותי (-39.1% ו -46.6%) בעקבות האוניברסיטה העברית במשך 14 ימים ו -28 ימים בהתאמה (p <0.001). לאחר 3 ימים של התאוששות soleus מסה משמעותית ל -74% של ערכים שליטה. משקולות הכליה של עכברים HU לא היו שונים בהשוואה לעכברים שליטה.
ההצלחה של השיטה שלנו הרומן HU מתבטא בשמירה על משקל גוף החיה, להשוות משקולות בלוטת יותרת הכליה, וניוון soleus HU הבאים, המתאים לערכים בספרות צפוי 2, 7, 8. היתרונות העיקריים של שיטה זו האוניברסיטה כוללים: 1) להקל על בדיקה הזנב במהלך ההשעיה; 2) ירדה הסבירות זנבות בכחלון, מודלק, ו / או נמקי נצפו לעתים קרובות עם מקליטה זנב HU: 3) כל אפשרות של עכברים ללעוס את המתיחה הקלטת יוצא של מנגנון ההשעיה, ו 4) התאוששות מהירה ופעילות כלוב נורמלי מיד אחרי האוניברסיטה העברית.
הערכנו שיטה חלופית של עכברים hindlimb פריקה, אשר אנו נחושים להיות מוצלח ביותר. השיטה זנב טבעת כמתואר כאן שימש ההשעיה לטווח ארוך hindlimb, וכדי ללמוד HU התאוששות הבאים. תחת כל התנאים הללו, לא היתה שום ראיה לכישלון להסתגל כפי שמעידים צריכת מזון יציבה, משקולות הגוף, משקולות הכליה של העכברים. זו טכניקה זנב טבעת HU קל לביצוע והוא יכול בקלות להיות משולב עם תרגול כירורגי מעט מאוד.
ישנם מספר יתרונות השיטה זנב טבעת לעומת השיטה המסורתית 6 מורי הולטון-5,. ראשית, את העור ואת ההשתלה אתר טבעת על הזנב, כי הם תמיד נראים לעין, כך שאם מתעוררות בעיות ברור מיד, ולא רק בסוף תקופת ההשעיה. שנית, בעלי חיים אינם מסוגלים לצאת מנגנון ההשעיה בכל עת במהלך האוניברסיטה העברית, obviating את הצורך להכריע האם להמשיך עכבר או לא ערכת הנתונים. יתר על כן, העכברים לא טורחים מנגנון הטבעת כאשר הם משתחררים מן האוניברסיטה העברית להתאוששות, הם לא להתעסק עם הזנבות שלהם, המאפשר לשלב ההתאוששות חלקה הבא של האוניברסיטה העברית. לבסוף, עכברים פרקו hindlimb עם שיטת זנב טבעת לשמור על משקל גוף שלהם טוב יותר מאשר עכברים hindlimb פרקו בטכניקת זנב המתיחה מורי-הולטון. בידיים שלנו לאחר 14 ימים של האוניברסיטה העברית צפינו הפסד קטן (-6.8%) אך לא משמעותי המוני הגוף. בעוד אינגלס et al. נצפתה ירידה משמעותית -12% ממשקל הגוף אצל עכברים לאחר 14 ימים של האוניברסיטה העברית על ידי מורי שיטת-הולטון 3. למרות אינגלס לא דיווחו משקולות יותרת הכליה, נראה כי שיטת זנב טבעת שלנו מעניק פחות לחץ על העכבר (משקולות הכליה בעכברים HU שלנו אינם שונים מאשר שולטת) ותחזוקה טובה יותר של משקל הגוף לאורך כל התקופה hindlimb פריקה.
לסיכום, טבעת זנב שיטת hindlimb הפריקה היה שפותחו ונבדקו על עכברים האוניברסיטה העברית עבור 14 ו 28 ימים, על עכברים חזר התאוששות בכלוב במשך 3 ימים אחרי האוניברסיטה העברית. על בסיס משקולות הכליה, מסת הגוף ואת צריכת המזון, עכברים הנראה מותאם היטב מנגנון זנב הטבעת. Hindlimb זנב טבעת פריקה השיטה היא אלטרנטיבה יעילה, פשוטה את הטכניקה המסורתית מורי-הולטון פריקה hindlimb.
The authors have nothing to disclose.
המחברים מבקשים להודות אנדרו J דאן, תלמידה מצטיינת לתואר מחקר במעבדה שלנו, לקבלת סיוע טכני שלו ודואג לבעלי החיים. מכון הבריאות הלאומי מענק HD058834 של אוניברסיטת מיזורי מדעי החיים המלגה במימון העבודה הזאת.
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
---|---|---|---|---|
Wire cutters/pliers | Ace Hardware | 84-056 | ||
Gauze | Fisher Scientific | 22-037-901 | ||
Heating pad | Sunbeam | Z-1228-001 | ||
Silver nitrate applicators | ARZOL | 0001-2 | ||
Isoflurane,USP | Novaplus | NDC 0409-3292-49 | ||
Chlorhexidine Gluconate 4% | Purdue Products L.P | NDC 67618-200-01 | ||
Sterile 2-0 surgical steel suture | Ethicon | SS-28 | ||
25 X 5/8 A gauge needle | Terumo | NN 2516R | ||
Hemostat/ needle holder | Fine Science Tools | 12500-12 | ||
Size 10-24 X 4 machine screws | Hillman The Fastener Center | 90272 | ||
Nylon lock nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180141 | ||
Wing nut size 10 X 24 | Hillman The Fastener Center | 180243 | ||
Fender Washer size ¼ X 1 | Hillman The Fastener Center | 290012 | ||
Fishing swivel with snap hook size #6, 1-11/16” | Bass Pro Shop | 38-481-554-01 | ||
Metal sewing machine bobbin. | Singer | 45785 | ||
Paper clip | Office Depot | 221720 | ||
2” black paper binder clamps. | Office Depot | 308957 | ||
Scotch Multi-Use Duct Tape | Office Depot | 790710 | ||
1-3/8” Plated slotted steel bar | Home Depot | 548932 | Extends slightly beyond the full length of the cage | |
50cm X 40cm X 20cm cage (rat cage | Alternative Design Manufacturing | RC88D-PC | ||
Water Bottle | Alternative Design Manufacturing | WB16FS | ||
Stainless Steel wire | Small Parts, Inc | SWX-4029 | U-shaped wire to support water bottle |