التحول من الحمض النووي البلازميد في كولاي استخدام أسلوب الصدمة الحرارية

Published: August 01, 2007
doi:

Abstract

التحول من الحمض النووي البلازميد في كولاي باستخدام أسلوب الصدمة الحرارية هي تقنية البيولوجيا الجزيئية الأساسية. وهو يتألف من إدخال المنتج الأجنبي أو ربط البلازميد في البكتيريا. هذا البروتوكول الفيديو يصف الطريقة التقليدية في التحول باستخدام البكتيريا المختصة متاحة تجاريا كيميائيا من Genlantis. بعد حضانة قصيرة في الجليد ، ويتم وضع خليط من البكتيريا كيميائيا المختصة والحمض النووي في 42 درجة مئوية لمدة 45 ثانية (الصدمة الحرارية) ، ثم توضع مرة أخرى في الجليد. يضاف SOC وسائل الإعلام ويتم تحضين الخلايا تحولت عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة مع الانفعالات. وأكد أن عزل المستعمرات بغض النظر عن كفاءة التحول ، مطلي كميتين من البكتيريا المتحولة. ويمكن استخدام هذا البروتوكول التقليدية بنجاح لتحويل معظم البكتيريا المختصة متاحة تجاريا. يمكن أيضا أن turbocells Genlantis من أن تستخدم في بروتوكول رواية التحول 3 دقائق ، والمبينة في دليل التعليمات.

check_url/fr/253?article_type=t

Play Video

Citer Cet Article
Froger, A., Hall, J. E. Transformation of Plasmid DNA into E. coli Using the Heat Shock Method. J. Vis. Exp. (6), e253, doi:10.3791/253 (2007).

View Video