הערכת נכסים איתות של Ectodermal epithelia במהלך פיתוח Craniofacial
Summary
מאמר זה מתאר השתלת רקמות טכניקה שנועדה לבדוק את איתות ותכונות של דפוסים האאקטודרם משטח cephalic במהלך הפיתוח craniofacial.
Abstract
הנגישות של עוברי העופות סייע embryologists ניסיוני להבין את גורלם של תאים במהלך ההתפתחות ואת תפקידו של אינטראקציות רקמות המווסתים דפוסים המורפוגנזה של בעלי חוליות (לדוגמה: 1, 2, 3, 4). כאן, אנו ממחישים שיטה זו מנצלת את הנגישות כדי לבדוק את איתות ותכונות דפוסים של רקמות ectodermal במהלך התפתחות הפנים. בניסויים אלו, אנו יוצרים שליו, חומוס 5 או עכבר חומוס 6 מפלצות ידי השתלת האאקטודרם משטח cephalic המכסה את הלסת העליונה של שליו או בעכבר על אזור או באותו אזור או מחוץ לרחם של עוברים חומוס. השימוש שליו כמו רקמות התורם להשתלה לתוך אפרוחים פותחה על מנת לנצל את הסמן nucleolar נוכח שליו אך לא תאים חומוס, ובכך מאפשר לחוקרים להבחין מארח ורקמות תורם 7. בדומה לכך, מרכיב חוזרות נמצא גנום העכבר, והוא הביע בכל מקום בגוף, אשר מאפשר לנו להבחין המארח רקמות התורם אפרוח ועכבר מפלצות 8. השימוש האאקטודרם עכבר כמו רקמות התורם יהיה מאוד להרחיב את ההבנה שלנו של האינטראקציות הללו רקמות, כי זה יאפשר לנו לבחון את המאפיינים של איתות האאקטודרם שמקורם בעוברים מוטנטיים שונים.
Protocol
Discussion
באמצעות שיטה זו השתלת אפשרה לנו לקבוע כי האאקטודרם מכיל מידע איתות המווסת את הקוטביות dorsoventral והסיומת proximodistal של הלסת העליונה. הדמיון של תוצאות בעת שימוש שליו או האאקטודרם העכבר השימור של אותות מולקולריים ברקמה זו בקרב מינים רבים 6,11 מציין כי מדובר במרכז איתות ש?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
עבודה זו מומנה על ידי R01-R01 DE018234 ו-DE019638.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 1x PBS | TEK | TEKZR114 | ||
| DMEM | UCSF | CCFDA003 | ||
| BSA | SIGMA | A7906 | ||
| Dispase | GIBCO | 17105-041 | ||
| 35×10 mm Petri dish | Falcon | 1008 | ||
| No. 5 Dumont forceps | Fine Science Tools | 11252-20 | ||
| Scissors | Fine Science Tools | 14058-11 | ||
| Spring Scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
| Needle holder | Fine Science Tools | 26016-12 | ||
| Tungsten Needle | Fine Science Tools | 26000 | ||
| Microcapillary tube | Drummond Scientific Company | 3-000-225-G | ||
| Pasteur Pipets | Fisher | 13-678-6B | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
| Blade holder | Fine Science Tools | 10052-11 | ||
| Razor blade | Fine Science Tools | 10050-00 |
References
- Noden, D. M. The Role of the Neural Crest in Patterning of Avian Cranial Skeletal, Connective, and Muscle Tissues. Biologie du développement. 96, 144-144 (1983).
- Bronner-Fraser, M., Stern, C. Effects of Mesodermal Tissues on Avian Neural Crest Cell Migration. Biologie du développement. 143, 213-213 (1991).
- Schneider, R. A. Neural crest can form cartilages normally derived from mesoderm during development of the avian head skeleton. Biologie du développement. 208, 441-441 (1999).
- Couly, G. Interactions between Hox-negative cephalic neural crest cells and the foregut endoderm in patterning the facial skeleton in the vertebrate head. Development. 129, 1061-1061 (2002).
- Evans, D. J., Noden, D. M. Spatial relations between avian craniofacial neural crest and paraxial mesoderm cells. Dev Dyn. , (2006).
- Hu, D., Marcucio, R., Helms, J. A. A zone of frontonasal ectoderm regulates patterning and growth in the face. Development. 130, 1749-1749 (2003).
- Hu, D., Marcucio, R. S. Unique organization of the frontonasal ectodermal zone in birds and mammals. Dev Biol. 325, 200-200 (2009).
- Le Lièvre, C. S., Le Douarin, N. M. Mesenchymal derivatives of the neural crest: analysis of chimaeric quail and chick embryos. Journal of Embryology and Experimental Morphology. 34, 125-125 (1975).
- Bollag, R. J. Use of a repetitive mouse B2 element to identify transplanted mouse cells in mouse-chick chimeras. Exp Cell Res. 248, 75-75 (1999).
- Korn, M. J., Cramer, K. S. Windowing chicken eggs for developmental studies. J Vis Exp. , (2007).
- Eames, B. F., Schneider, R. A. Quail-duck chimeras reveal spatiotemporal plasticity in molecular and histogenic programs of cranial feather development. Development. 132, 1499-1499 (2005).
- Odent, S. Expression of the Sonic hedgehog (SHH ) gene during early human development and phenotypic expression of new mutations causing holoprosencephaly. Hum Mol Genet. 8, 1683-1683 (1999).
- Szabo-Rogers, H. L. Novel skeletogenic patterning roles for the olfactory pit. Development. 136, 219-219 (2009).
