Kraniofasial Geliştirme sırasında Ektodermal Epiteli Sinyal Özellikleri değerlendirilmesi
Summary
Bu makale, kraniyofasiyal gelişimi sırasında sinyalizasyon ve yüzey sefalik ektoderm desenlendirme özellikleri test etmek için tasarlanmış bir doku nakli tekniği açıklar.
Abstract
Erişilebilirlik kuş embriyoların deneysel embriyologlar kalkınma ve desenlendirme ve omurgalıların morfolojilerinden (örneğin, 1, 2, 3, 4) düzenleyen doku etkileşimleri rol sırasında hücre kaderi anlamaya yardımcı olmuştur. Burada, yüz gelişimi sırasında ektodermal dokuların sinyalizasyon ve desenlendirme özelliklerini test etmek için bu erişilebilirlik yararlanan bir yöntem göstermektedir. Bu deneylerde, aynı bölgede ya da bir civciv embriyo ektopik bölge üzerine, bıldırcın ya da fare üst çene kapsayan yüzey sefalik ektoderm nakli bıldırcın-chick 5 veya fare civciv 6 kimeralar oluşturmak. Civciv içine nakli için donör doku olarak bıldırcın kullanımı, böylece araştırmacılar host ve donör dokuları 7 ayırt etmek için izin, bıldırcın içinde mevcut değil civciv hücreleri nucleolar marker yararlanmak için geliştirilmiştir . Aynı şekilde, bize fare civciv kuruntulardan 8 host ve donör dokuları ayırt etmek için izin verir, tekrarlayan bir unsur fare genomunda mevcut ve yayg ifade edilir. Bu bize çeşitli mutant embriyolardan elde edilen ektoderm sinyalizasyon özellikleri test etmek için izin verecek, çünkü donör doku olarak fare ektoderm kullanımı büyük ölçüde, bu doku etkileşimleri anlayışımızı uzatacaktır.
Protocol
Discussion
Bu nakli yöntemi kullanarak bize ektoderm dorsoventral polarite ve üst çene proximodistal uzatma düzenleyen sinyal bilgisini içerdiğini belirlemek için izin verdi. Bıldırcın veya fare ektoderm, ve birçok türün 6,11 arasında bu doku moleküler sinyaller korunması kullanarak sonuçların benzerlik omurgalıların hiçbirinde görülmeyen, son derece korunmuş bir sinyalizasyon merkezi olduğunu gösterir . Ayrıca, diğer araştırmacılar, farklı bölgelerin yüzey sefalik ektoderm sinyalizasyo…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Bu çalışma, R01-DE018234 ve R01-DE019638 tarafından finanse edildi.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| 1x PBS | TEK | TEKZR114 | ||
| DMEM | UCSF | CCFDA003 | ||
| BSA | SIGMA | A7906 | ||
| Dispase | GIBCO | 17105-041 | ||
| 35×10 mm Petri dish | Falcon | 1008 | ||
| No. 5 Dumont forceps | Fine Science Tools | 11252-20 | ||
| Scissors | Fine Science Tools | 14058-11 | ||
| Spring Scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
| Needle holder | Fine Science Tools | 26016-12 | ||
| Tungsten Needle | Fine Science Tools | 26000 | ||
| Microcapillary tube | Drummond Scientific Company | 3-000-225-G | ||
| Pasteur Pipets | Fisher | 13-678-6B | ||
| Spring scissors | Fine Science Tools | 15010-11 | ||
| Blade holder | Fine Science Tools | 10052-11 | ||
| Razor blade | Fine Science Tools | 10050-00 |
References
- Noden, D. M. The Role of the Neural Crest in Patterning of Avian Cranial Skeletal, Connective, and Muscle Tissues. Biologie du développement. 96, 144-144 (1983).
- Bronner-Fraser, M., Stern, C. Effects of Mesodermal Tissues on Avian Neural Crest Cell Migration. Biologie du développement. 143, 213-213 (1991).
- Schneider, R. A. Neural crest can form cartilages normally derived from mesoderm during development of the avian head skeleton. Biologie du développement. 208, 441-441 (1999).
- Couly, G. Interactions between Hox-negative cephalic neural crest cells and the foregut endoderm in patterning the facial skeleton in the vertebrate head. Development. 129, 1061-1061 (2002).
- Evans, D. J., Noden, D. M. Spatial relations between avian craniofacial neural crest and paraxial mesoderm cells. Dev Dyn. , (2006).
- Hu, D., Marcucio, R., Helms, J. A. A zone of frontonasal ectoderm regulates patterning and growth in the face. Development. 130, 1749-1749 (2003).
- Hu, D., Marcucio, R. S. Unique organization of the frontonasal ectodermal zone in birds and mammals. Dev Biol. 325, 200-200 (2009).
- Le Lièvre, C. S., Le Douarin, N. M. Mesenchymal derivatives of the neural crest: analysis of chimaeric quail and chick embryos. Journal of Embryology and Experimental Morphology. 34, 125-125 (1975).
- Bollag, R. J. Use of a repetitive mouse B2 element to identify transplanted mouse cells in mouse-chick chimeras. Exp Cell Res. 248, 75-75 (1999).
- Korn, M. J., Cramer, K. S. Windowing chicken eggs for developmental studies. J Vis Exp. , (2007).
- Eames, B. F., Schneider, R. A. Quail-duck chimeras reveal spatiotemporal plasticity in molecular and histogenic programs of cranial feather development. Development. 132, 1499-1499 (2005).
- Odent, S. Expression of the Sonic hedgehog (SHH ) gene during early human development and phenotypic expression of new mutations causing holoprosencephaly. Hum Mol Genet. 8, 1683-1683 (1999).
- Szabo-Rogers, H. L. Novel skeletogenic patterning roles for the olfactory pit. Development. 136, 219-219 (2009).
