Finger-stick Blodprovstagning Metodik för bestämning av ansträngningsutlöst-lymfocyter Apoptos
Summary
Motion är kapabel att inducera apoptos i immunceller. Det finns olika mått begränsningar, särskilt avseende den tid som krävs för att isolera och behandla ett blodprov före bedömningen. Bevisat är en snabb och minimalt invasiv förfarande för analys av ansträngningsutlöst lymfocyter apoptos.
Abstract
Motion är en fysiologisk stimulans som kan inducera apoptos i immunceller. Hittills har olika begränsningar identifierats med mätningen av detta fenomen, särskilt avseende den tid som krävs för att isolera och behandla ett blodprov före bedömningen av celldöd. På grund av detta är det svårt att avgöra om rapporterade ökningar i immunceller apoptos kan bidragit till den faktiska effekten av träning på systemet, eller är en återspegling av den tid och som är nödvändig för att så småningom få denna mätning. I den här artikeln visar vi ett snabbt och minimalt invasiv förfarande för analys av ansträngningsutlöst-lymfocyter apoptos. Till skillnad från andra tekniker är helblod läggs till en antikropp panel omedelbart efter att erhålla ett prov. Efter inkubationstiden, är röda blodkroppar lyseras och prover är klara för analys. Användningen av ett finger-stick provtagning reducerar volymen som krävs blod, och minimerar obehag för försökspersoner.
Protocol
Discussion
Ett minimalt invasiv provtagning och den efterföljande analysen visas för analys av både tidiga och sena faser av ansträngningsutlöst lymfocyter apoptos. Det är också möjligt att tydligt utesluta de celler, som är nekrotisk och inte apoptotiska. Detta förfarande övervinner nackdelarna och obehag i samband med invasiva venpunktionen från armvecket regionen Vid flera tillfällen undersöktes före, under och omedelbart efter träning, eller sörjer en kateter under hela övningen matchen. När det gäller utre…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Denna forskning stöds av en ny fakultet Grant från fakulteten Stipendium rådet vid Western Kentucky University.
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Flow Cytometry Binding Buffer | eBioscience | 00-4222-26 | ||
| RBC Lysis Buffer | eBioscience | 00-4333-57 | ||
| Lancet Device | Accu Check Soft Touch | Roche Diagnostics Corp. | ||
| Capillary tubes | Heparinized Capillary Tubes | Chase Scientific Glass, Inc. | 501 | |
| Centrifuge | GmC Lab | Gilson | PMS-880 | |
| Annexin V-FITC Conjugated | Biovision Inc. | K201-400-1 | ||
| CD4-PE Conjugated | Anti-human, clone RPA-T4 | eBioscience | 12-0049-42 | |
| CD8-PE Conjugated | Anti-human, clone OKT8 | eBioscience | 12-0086-73 | |
| CD19-PE Conjugated | Anti-human, clone HIB19 | eBioscience | 12-0199-42 | |
| 7-AAD Viability Staining Solution | eBioscience | 00-6993-50 | ||
| CD45RA-APC Conjugated | Anti-human, clone HI100 | eBioscience | 17-0458-42 | |
| Flow cytometer | C6 | Accuri |
References
- Simpson, R. J., Florida-James, G. D., Whyte, G. P., Black, J. R., Ross, J. A., Guy, K. Apoptosis does not contribute to the blood lymphocytopenia observed after intensive and downhill treadmill running in humans. Res. Sports Med. 15, 157-174 (2007).
- Steensberg, A., Morrow, J., Toft, A. D., Bruunsgaard, H., Pedersen, B. K. Prolonged exercise, lymphocyte apoptosis and F2-isoprostanes. Eur. J. Appl. Physiol. 87, 38-42 (2002).
- Mooren, F. C., Bloming, D., Lechtermann, A., Lerch, M. M., Völker, K. Lymphocyte apoptosis after exhaustive and moderate exercise. J. Appl. Physiol. 93, 147-153 (2002).
- Peters, E. M., Eden, M. V. a. n., Tyler, N., Ramautar, A., Chutergoon, A. A. Prolonged exercise does not cause lymphocyte DNA damage or increased apoptosis in well-trained endurance athletes. Eur. J. Appl. Physiol. 98, 124-131 (2006).
- Wang, J. -. S., Huang, Y. -. H. Effects of exercise intensity on lymphocyte apoptosis induced by oxidative stress in men. Eur. J. Appl. Physiol. 95, 290-291 (2005).
- Mooren, F. C., Lechtermann, A., Völker, K. Exercise-induced apoptosis of lymphocytes depends on training status. Med. Sci. Sports Exerc. 36, 1476-1483 (2004).
- Navalta, J. W., Sedlock, D. A., Park, K. -. S. Blood treatment influences the yield of apoptotic lymphocytes after maximal exercise. Med. Sci. Sports Exerc. 37, 369-373 (2005).
