इम्यून प्रतिक्रियाएँ इंजीनियर हार्ट ऊतक के आरोपण के बाद एसेसमेंट (EHT) के लिए bioluminescence इमेजिंग
Summary
इस वीडियो के उपयोग को दर्शाता है<em> Vivo में</em> Bioluminescence इमेजिंग करने के लिए चूहों में इंजीनियर हार्ट ऊतक के आरोपण (EHT) के बाद प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का अध्ययन.
Abstract
हृदय ऊतक इंजीनियरिंग की विभिन्न तकनीकों मचान या तो देशी या bioartificial पाड़ सामग्री, जैसे आतंच या कोलेजन hydrogels में हृदय myocytes की फंसाने और myocyte 1 monolayers के stacking का उपयोग रणनीतियों सहित पिछले दशकों में किया गया जारी है. समझौता हृदय समारोह (जैसे रोधगलन के बाद) की बहाली पर या प्रयोगात्मक मॉडल (जैसे पेशीनगोई विष विज्ञान और पदार्थ स्क्रीनिंग या रोग मॉडलिंग) के रूप में इन अवधारणाओं के उद्देश्य. इंजीनियर हृदय के ऊतकों (EHT) के आरोपण के बाद सेल अस्तित्व के सटीक निगरानी अब संभव हो गया है bioluminescence इमेजिंग (BLI) 2 तकनीकों में vivo में उपयोग. यहाँ हम जुगनू luciferase (; 3 रोज़ा / luciferase ल्यू टीजी) के सर्वव्यापी अभिव्यक्ति के साथ एक ट्रांसजेनिक चूहा तनाव से आतंच आधारित EHT की पीढ़ी का वर्णन . आरोपण अलग चूहा उपभेदों के अधिक से अधिक omentum EHT आरोपण के बाद प्राप्तकर्ता जीव की प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन में किया जाता है. BLI और एनजाइम लिंक्ड इम्यूनो स्पॉट (ELISPOT) तकनीक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के मूल्यांकन के लिए BLI के प्रयोज्य की पुष्टि द्वारा उत्पन्न परिणामों की तुलना.
Protocol
Discussion
हृदय की मरम्मत के लिए EHT प्रौद्योगिकी के नैदानिक कार्यान्वयन के पहले, दोनों सेलुलर और मैट्रिक्स घटकों या भ्रष्टाचार अस्तित्व के आरोपण के बाद प्रतिरक्षाजनकता के रूप में मौलिक सवालों के प्रयोगात्मक …
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
सोनिया Schrepfer, Lenard Conradi और Arne Hansen ड्यूश Forschungsgemeinschaft (; SCHR992/3-1, SCHR992/4-1, सीओ 858/1-1, 3423/3-1 हा DFG) से धन प्राप्त किया. काम भी यूरोपीय संघ से थॉमस Eschenhagen (EUGeneHeart और Angioscaff) अनुदान द्वारा समर्थित किया गया.
Materials
- LEW-Tg(Gt(ROSA)26Sor-luc)11Jmsk rats (NBPR rat number 0299, http://www.anim.med.kyoto-u.ac.jp/NBR/)
- Bovine fibrinogen (stock solution: 200 mg/ml plus aprotinin 5 μg/ml fibrinogen in NaCl 0.9%, Sigma F4753)
- Matrigel (BD Bioscience 356235)
- DMEM (Biochrome F0415)
- Horse serum (Gibco 26050)
- Penicillin/streptomycin (Gibco 15140)
- Insulin (Sigma-Aldrich I9278)
- Aprotinin (Sigma Aldrich A1153)
- d-Luciferin (Biosynth L-8220)
- Enzyme-linked immunosorbent spot (ELISpot) assay plates (Hassa Laborbedarf, S2EM004M99)
References
- Eschenhagen, T., Zimmermann, W. H. Engineering myocardial tissue. Circ Res. 97, 1220-1231 (2005).
- van der Bogt, K. E., Schrepfer, S., Yu, J. Comparison of transplantation of adipose tissue- and bone marrow-derived mesenchymal stem cells in the infarcted heart. Transplantation. 87, 642-652 (2009).
- Hakamata, Y., Murakami, T., Kobayashi, E. “Firefly rats” as an organ/cellular source for long-term in vivo bioluminescent imaging. Transplantation. 81, 1179-1184 (2006).
- Hansen, A., Eder, A. Development of a Drug Screening Platform Based on Engineered Heart Tissue. Circ Res. , (2010).
