この記事では、ミネラルオイル下外、先端録音を経由して個々の感覚器に化学的刺激を単離するための電気生理学的方法を説明します。
我々は、電気生理学的に短く、ペグのような感覚感覚器3,4を調査するため、既存の先端記録技術の1,2の変更を説明します。すべてのサソリの半ば腹側表面にメカノと化学的感覚ペグ感覚器5,6の密なフィールドがあるpectinesという二つの付属です。これらの感覚器のchemoresponsivenessを評価するための一つの方法は、揮発性の匂いが感覚フィールド5,7に導入される細胞外に感覚子内の神経活動を記録するためのタングステン電極を使用しています。この方法の制限は、低速なデータ収集と制御されていない刺激の導入、そしてペグのフィールドからの削除などがあります。これらの制限を克服するために、我々は、個々のpeg感覚器8,9に水ベースのtastantsを提供を通す媒体として非極性鉱物油を使用する新しい先端記録技術を開発した。我々は成功し、クエン酸、エタノール、および塩にsensillar chemoresponsesを取得するためにこのメソッドを適用している。ここではそのような研究9の実験的なプロトコルについて説明します。我々はこの新しい方法は昆虫10、11、甲殻類12のものも含めて他の節足動物化学的感覚のシステムの応答特性を研究するために有用かもしれないと思う。
上記のプロトコルは、電気生理学的研究のために砂漠草原サソリ(Paruroctonus utahensisを )準備する方法について説明します。具体的には、油の下にpectinal化学感覚ニューロンの制御された細胞外の先端 – 記録用チャンバーを構築する方法を示します。油と水が混合しないため、単一の感覚器に化学的刺激を(水ベースの刺激剤との)分離することが可能です。それは、P.ことを強調しておきたいutahensis、比較的小さな動物(≈2.5〜5センチメートル)であり、より大きな動物にこのプロトコルを適用すると、このような動物のプラットフォーム、チャンバー、および適用される油の量の大きさなど、多くのサイズの調整を必要とする可能性があります。我々は、水ベースの化学覚せい剤の制御された送達のために必要な油の最少量をテストするパイロット研究を実施することをお勧めします。
さらに、我々はpectinal感覚器8内のベースラインの神経活動のオイルの効果は認められなかった。この前chemoresponsivenessを評価するだけでなく、他のモデルシステムのために確認されるべきである。
このメソッドは、感覚分野における感覚器の間でchemoresponse相互作用の効果をテストする別の方法と組み合わせて使用することができます。例えば、それは近隣の感覚子9から我々のベースレコード(タングステン電極を介して)として1つの感覚子からtip -記録(油下)に可能です。このような記録の構成は、化学的にone感覚子を刺激しているかどうかを評価するために使用することがベースに記録された感覚子の神経活動に影響を与えます。これまでに、誰もサソリpectinal感覚器のためにこれをテストしていない、そしてそれは同様に他の化学的感覚のシステムの未解決の問題のまま。
要約すると、我々は、石油の進歩節足動物味覚の神経基盤に電気生理学的研究の範囲で先端の記録方法を考える。この原稿では、我々はこの方法のために動物を準備するためのプロトコルを提供し、我々はそれが末梢感覚神経系のさらなる研究のための確固たる基盤を提供する願っています。
The authors have nothing to disclose.
我々は生命のファンド、オクラホマ大学学部研究機会プログラム、およびこの作業に資金を提供するための動物の部に感謝。我々はまた、編集のヘルプは博士マリエルのHoefnagelsに感謝。
Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
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Lift-N-Press tab | Ted Pella, Inc. | 16082 | Doubled-sided adhesive | |
MicroFil | World Precision Instruments, Inc. | MF34G | Micropipette filler | |
Standard Glass Capillaries | World Precision Instruments, Inc. | 1B100F-6 | Glass pipettes | |
Microelectrode Holder | World Precision Instruments, Inc. | MEH3SBW10 |