Kvantitativa, hög genomströmning, i realtid, och etikett-fri biomolekylär detektion (DNA, protein, etc.) på SiO<sub> 2</sub> Ytor kan uppnås med en enkel interferometriska teknik som bygger på LED-belysning, minimala optiska komponenter och en kamera. Den interferometriska Reflektans Imaging Sensor (IRIS) är billig, enkel att använda och mottaglig för microarray format.
Den känsliga mätning av biomolekylära interaktioner har användning inom många områden och branscher som grundläggande biologi och mikrobiologi, miljö / jordbruk / bioförsvar övervakning, nanobioteknik och mycket mer. För diagnostiska tillämpningar, (upptäcka) övervaka förekomsten, avsaknaden eller onormalt uttryck av riktade proteomik och genomik biomarkörer som finns i patientprover kan användas för att bestämma behandlingsmetoder eller terapi effekt. I forskningen arenan, information om molekylära tillhörighet och särdrag är användbara för fullt karakterisera de system som undersöks.
Många av de nuvarande systemen för att bestämma molekylära koncentrationer eller släktskap förlita sig på användningen av etiketter. Exempel på dessa system ingår immunoanalyser som enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), polymeraskedjereaktion (PCR) teknik, gel analyser elektrofores och masspektrometri (MS). Generellt dessa etiketter är fluorescerande, radiologiska eller kolorimetriska i naturen och är direkt eller indirekt knutna till molekylära målet av intresse. Även användningen av etiketter är allmänt accepterad och har vissa fördelar, finns nackdelar som stimulerar utvecklingen av nya etikett-fri metoder för att mäta dessa interaktioner. Dessa nackdelar inkluderar praktiska aspekter såsom ökad analys kostnad, reagens livslängd och användbarhet, lagring och säkerhetsproblem, bortkastad tid och kraft på märkning och variationsrikedomen bland de olika reagenser på grund av märkning, eller etiketter själva. På en vetenskaplig forskning grund kan använda dessa etiketter införa också svårigheter som gäller med effekter på proteiner fungerar / struktur på grund av förekomsten av den bifogade etiketter och oförmågan att direkt mäta interaktioner i realtid.
Presenteras här är att använda en ny etikett utan optisk biosensor som är mottaglig för microarray-studier, det så kallade interferometriska Reflektans Imaging Sensor (IRIS), för att upptäcka proteiner, DNA, antigena material, hela patogener (virioner) och annat biologiskt material. IRIS-systemet har visat sig ha hög känslighet, precision och reproducerbarhet för olika biomolekylära interaktioner [1-3]. Fördelarna är bland annat förmågan multiplex avbildning, i realtid och endpoint kapacitet mätning, och andra med hög genomströmning attribut såsom minskad reagensförbrukningen och en minskning av analys gånger. Dessutom är IRIS-plattformen enkel att använda, kräver billig utrustning och använder kiselbaserade Solid Components fas-analysen vilket gör den kompatibel med många moderna metoder ytkemi.
Här presenterar vi användning av IRIS-systemet från förberedelse av givare matriser för inkubation och mätning av mål bindning till analys av resultaten i en endpoint-format. Modellen Systemet kommer att tillfångatagandet av mål antikroppar som är specifika för humant serumalbumin (HSA) på HSA-spotted substrat.
IRIS-plattformen är ett enkelt och snabbt system att använda för att samla in high-throughput bindande data i en microarray format. Genom kovalent immobilisera olika funktionella proteiner eller DNA-prober på en yta, mål antigener / biomarkörer / etc. kan fångas av lösningen, som i en immunoassay. Mätning av dessa interaktioner mellan sond förhållanden i en endpoint eller realtid format med IRIS-systemet tillåter mycket känslig och kvantitativ information som skall samlas in för varje interaktion. Representanten Experimentet beskrivs här är bara ett exempel av de typer av interaktioner som kan studeras med denna teknik. Upptäckt av transkriptionsfaktorer, virusantigener, och hela virus har visats tidigare och representerar bara några exempel på de typer av analyser som IRIS lätt kan hantera.
The authors have nothing to disclose.
Författarna vill tacka Zoiray Technologies Inc., en co-sponsor och kommersialisering partner för dess stöd.